甲狀腺功能紊亂時ghrelin和瘦素的改變及意義的研究.pdf

1、Ghrelin，是近年來在大鼠胃中發(fā)現(xiàn)的新的促進生長激素(growthhormone，GH)釋放的?；?，是迄今為止唯一在體內發(fā)現(xiàn)的生長激素釋放激素受體(secretagoguereceptor，GHS-R)的天然配體。它可以在垂體前葉通過與GHS-R結合，刺激GH的釋放。現(xiàn)已在人和大鼠的胃中發(fā)現(xiàn)了Ghrelin及它的信使RNA(mRNA)，但它的細胞來源目前還不很明確。通過免疫熒光顯微鏡，人們已經在人和大鼠的胃腸道內發(fā)現(xiàn)了分泌Ghr

2、elin的細胞。 ghrelin免疫反應性細胞不是類腸嗜鉻樣細胞，也不是D細胞和腸嗜鉻樣細胞，它在人和大鼠的泌酸腺體的內分泌細胞中占了20％。目前已經發(fā)現(xiàn)大鼠的ghrelin在X/A樣細胞內有表達。X/A樣細胞是電子致密的圓形細胞，它所分泌的其他激素及其生理功能目前還不明了。ghrelin分泌細胞(ghrelin細胞)的定位及其整體和超微結構特征都顯示是X/A樣細胞。Ghrelin還在人和大鼠的腸道內分泌細胞中有表達。

3、Ghrelin可能在胃腸道中有許多重要功能，如調控腸道動力學、胃酸的分泌、腸道上皮細胞的更新等，這些都是需要進一步研究的領域。檢測在不同生理和病理狀態(tài)下胃腸道中ghrelin的蛋白表達量及它的mRNA表達量將提供更多關于ghrelin的信息，如它的生物合成機制、分泌機制、調控機制等。 Ghrelin有強大的促生長激素分泌的作用。經研究發(fā)現(xiàn)，Ghrelin的功用遠不止如此，它還有許多其它不依賴于促生長激素釋放作用的病理生理作用，如

4、刺激催乳素細胞和促腎上腺皮質激素細胞的作用；影響垂體性腺功能；調節(jié)食欲、維持能量平衡；影響睡眠和行為；調控胃能動性和胃酸分泌；影響胰腺的內外功能和糖代謝；影響心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能及腫瘤細胞的增殖轉化。Ghrelin的發(fā)現(xiàn)開啟了神經內分泌學、新陳代謝、胃腸內科學、免疫學、腫瘤學和心臟病學的新的研究領域。Ghrelin和/或GHS類似物在不同的生理活動中起協(xié)同或拮抗作用，提示可能其有明顯的臨床影響，越來越受到關注。我們發(fā)現(xiàn)Ghrelin

5、在人類多種疾病中發(fā)揮作用。Ghrelin在許多方面的探討僅是初步的，有待于進一步深入全面的研究。 瘦素是由肥胖基因(ob)編碼、脂肪細胞產生的蛋白質類激素，具有廣泛的生物學效應?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)瘦素與神經內分泌系統(tǒng)之間組成了一個雙向閉合環(huán)路，一方面它作用于下丘腦、胰腺、腎上腺、甲狀腺、性腺發(fā)揮調節(jié)功能；另一方面，又受這些神經內分泌器官的負反饋調節(jié)，表現(xiàn)出許多重要生理功能。許多研究表明瘦素與其它調節(jié)代謝平衡和飲食行為的激素之間可能存在一定

6、的關系，下丘腦-垂體-甲狀腺軸可能影響瘦素的分泌和代謝。 本文旨在通過動物實驗和臨床研究探討大鼠各組織中ghrelin的表達，ghrelin、瘦素和甲狀腺素的相關性，以及甲狀腺功能紊亂時甲狀腺激素對ghrelin和瘦素水平的影響。 第一部分Ghrelin在正常大鼠不同組織中的表達的研究 目的:探討ghrelin在正常大鼠不同組織中的表達。 方法:采用免疫印跡技術(western-blot)和逆轉錄聚合酶鏈

7、反應(RT-PCR)方法檢測大鼠胃、腦、肝、腎、脾、胰、脂肪、肌肉、心肌、十二指腸、空腸、回腸、淋巴結、睪丸、腎上腺、甲狀腺、肺中ghrelin的表達水平。 結果:正常大鼠胃、十二指腸、空腸、回腸、腦、肝、腎、脾、胰、脂肪、肌肉、淋巴結、睪丸、腎上腺、甲狀腺、肺中都有ghrelin的表達，但心肌內沒有檢測到ghrelin的表達。 結論:ghrelin廣泛分布于大鼠的各個組織中，并在不同組織中具有表達差異，其中以胃的表達量

8、最多，提示可能具有多種生物學功能。 第二部分正常大鼠體內ghrelin、瘦素和甲狀腺素相關性的研究 目的:探討正常大鼠體內ghrelin、瘦素、甲狀腺激素及與體重的相關性。 方法:采用放射免疫方法檢測正常大鼠血清ghrelin、瘦素、T3、T4和TSH的水平，并檢測大鼠體重。 結果:正常大鼠血ghrelin與體重呈負相關，相關系數為-0.87(P=0.0014)，而瘦素與體重呈正相關，相關系數為0.78

9、(P=0.0076)；大鼠血清ghrelin與瘦素及甲狀腺激素(T3、T4)分別呈負相關，相關系數分別為-0.76(P=0.0092)、-0.79(P=0.0073)、-0.69(P=0.0237)，與TSH呈正相關，相關系數為0.67(P=0.0355)，而瘦素與甲狀腺激素(T3，T4)成正相關，相關系數為0.66(P=0.0399)和0.68(P=0.0281)，與TSH呈負相關，相關系數為-0.86(P=0.0020)。

10、結論:ghrelin與體重、瘦素和甲狀腺激素代謝密切相關，可作為一個很好的營養(yǎng)指數。 第三部分甲狀腺功能紊亂時ghrelin、瘦素血清、蛋白及mRNA水平改變及其意義的研究 目的:下丘腦-垂體-甲狀腺軸可能影響瘦素和ghrelin的分泌和代謝。本研究旨在探討甲狀腺功能減低和甲狀腺功能亢進時甲狀腺激素對血清瘦素、ghrelin水平，以及脂肪瘦素和胃的ghrelin蛋白和mRNA水平的影響及其意義。 方法:

11、 1.應用他巴唑和優(yōu)甲樂人工造成大鼠甲狀腺功能減低和甲狀腺功能亢進狀態(tài)，分別于用藥10天、停藥10天檢測用藥組、停藥組和正常對照大鼠血清瘦素、ghrelin、T3、T4、TSH濃度、體重、胃ghrelin和脂肪瘦素的蛋白和mRNA水平。 2.臨床檢測15例甲狀腺功能低下患兒和10例甲狀腺功能亢進患兒治療前后血清ghrelin、瘦素、T3、T4、TSH濃度和體塊指數(BMI)，同期檢測10例正常兒童的上述各項指標作對照。

12、結果: 1.甲減用藥組、甲亢用藥組和正常對照組大鼠血清瘦素與體重均有相關性(P均＜0.05)，相關系數分別0.83、0.82、0.78，ghrelin與體重成負相關性，相關系數分別-0.81、-0.89、-0.87(P均＜0.05)；去除體重因素，甲亢用藥組、停藥組血清瘦素和脂肪瘦素蛋白和mRNA水平和正常對照組相比無明顯差別(P＞0.05)，而甲減用藥組血清瘦素(1.18±0.24ng/ml)和脂肪瘦素mRNA水平(0.36±

13、0.12)顯著低于停藥組(1.88±0.27ng/ml)、(0.91±0.12)和正常對照組(2.12±0.15ng/ml)、(0.87±0.15)(P均＜0.05)，瘦素蛋白表達水平也有同樣的改變；而甲亢用藥組血清ghrelin(64.70±9.57pg/ml)顯著低于停藥組(137.80±22.68Pg/ml)和正常對照組(140.40±13.62pg/ml)(P均＜0.05)，甲減組(255.90±27.50pg/ml)則顯著升高

14、(P＜0.05)，蛋白和mRNA的改變趨勢相同。2.臨床觀察甲亢組、甲低組和正常對照組中，ghrelin與BMI均有負相關(P＜0.05)，相關系數分別為-0.68、-0.69、-0.91；瘦素與BMI均正相關(P＜0.05)，相關系數分別為0.78、0.72、0.74；在年齡、性別和BMI均相匹配的情況下，甲亢組血清ghrelin(1022.00±112.42)pg/ml顯著低于正常對照組(1783.00±141.11)pg/ml(P

15、＜0.05)，甲低組治療前血清ghrelin(2496.67±243.51)pg/m顯著高于正常對照組(P＜0.05)；甲低組瘦素水平(0.4±0.31)ng/ml顯著低于甲亢組(2.55±0.37)ng/mi和正常對照組(2.01±0.25)ng/ml(P均＜0.05)，用左旋甲狀腺素片治療使甲狀腺功能恢復到正常后，血清瘦素水平升高至(1.77±0.25)ng/ml，達到正常水平；甲亢組治療前瘦素水平與治療后(2.17±0.21)ng