瘦素、食欲素-A在肝、腸損傷介導(dǎo)的內(nèi)環(huán)境紊亂中的變化及對(duì)臟器功能的影響.pdf

1、瘦素(Leptin)是一種主要作用為抑制攝食、促進(jìn)能量消耗的活性因子，食欲素-A(Orexin-A)是一種主要作用為促進(jìn)攝食、抑制能量消耗的短肽。目前研究發(fā)現(xiàn)Leptin可通過腺苷酸活化蛋白激酶、過氧化物酶體增殖物激活受體-α等途徑抑制糖原合成、促進(jìn)脂肪酸氧化，Orexin-A在能量代謝中的作用及其在一定條件下的表達(dá)水平都與Leptin相反，而且它們與糖皮質(zhì)激素、交感神經(jīng)興奮性、炎癥介質(zhì)都存在聯(lián)系，提示它們可能參與調(diào)控創(chuàng)傷、炎癥、感染后

2、的內(nèi)環(huán)境紊亂。由于肝臟、腸道是營養(yǎng)吸收、能量代謝的重要器官，本文考察了Leptin、Orexin-A的表達(dá)水平在肝、腸損傷時(shí)發(fā)生的變化，分析了這些變化與重要臟器的結(jié)構(gòu)損傷、功能改變之間的聯(lián)系，并探討了創(chuàng)傷后營養(yǎng)支持、激素干預(yù)對(duì)它們的表達(dá)水平和臟器功能的影響。 1.肝缺血/再灌注損傷后Leptin、Orexin-A表達(dá)水平的變化及與臟器功能的聯(lián)系 建立大鼠70％肝缺血/再灌注損傷模型，設(shè)立假手術(shù)、缺血60min后不同時(shí)間的

3、再灌注組。采用放免法檢測(cè)Leptin、Orexin-A在外周血、各自的核心分泌器官(脂肪、下丘腦)的蛋白水平；采用蘇木素-伊紅染色考察與自由基損傷、能量代謝密切相關(guān)的外周臟器(肺、肝)的損傷情況，以試劑盒檢測(cè)血清髓過氧化物酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶作為肺、肝功能指標(biāo)，以血清總抗氧化能力、葡萄糖作為抗自由基損傷、能量儲(chǔ)備的代謝指標(biāo)；采用免疫組化檢測(cè)Leptin、Orexin-A在肺、肝的蛋白表達(dá)；采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)Leptin、Or

4、exin-A及其受體在下丘腦、脂肪、肺、肝的mRNA表達(dá)。從縱向時(shí)序變化的角度考察它們的表達(dá)改變與臟器功能的聯(lián)系。 結(jié)果顯示，血清Leptin、總抗氧化能力和葡萄糖于再灌注后期顯著升高，脂肪Leptin蛋白水平在再灌注早期顯著升高，血漿、下丘腦Orexin-A蛋白水平無顯著變化。再灌注后期肺、肝損傷情況及其功能指標(biāo)顯著改善。肺Leptin、Orexin-A蛋白表達(dá)顯著降低，肝Leptin蛋白表達(dá)于再灌注早期、后期顯著升高，而肝O

5、rexin-A蛋白表達(dá)變化與之相反。各臟器Leptin、Orexin-A mRNA表達(dá)的變化趨勢(shì)非常相似，其受體mRNA表達(dá)緊隨它們而變化。 2.營養(yǎng)支持、激素干預(yù)對(duì)膿毒癥時(shí)Leptin、Orexin-A表達(dá)水平及臟器功能的影響 第一部分的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示Leptin、Orexin-A的表達(dá)水平受能量代謝的調(diào)控，與下丘腦-脂肪-肺/肝這條功能主線存在顯著聯(lián)系。由于脂肪乳、胰島素、雌二醇與能量代謝、創(chuàng)傷修復(fù)都存在聯(lián)系，我們?cè)O(shè)想

6、利用它們來干預(yù)創(chuàng)傷后的脂肪酸代謝、糖代謝和激素分泌，可能會(huì)對(duì)Leptin、Orexin-A的表達(dá)水平及臟器功能產(chǎn)生影響。建立大鼠盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)致膿毒癥模型，設(shè)立假手術(shù)、CLP模型和三個(gè)藥物干預(yù)組。檢測(cè)CLP后12h時(shí)Leptin、orexin-A在外周血、肺、肝的蛋白表達(dá)與它們?cè)谙虑鹉X、脂肪、肺、肝的mRNA表達(dá)，考察肺、肝的損傷情況以及臟器功能、代謝指標(biāo)的變化。從橫向干預(yù)差異的角度考察它們的表達(dá)改變與臟器功能的聯(lián)系。

7、結(jié)果顯示，各組血清Leptin、總抗氧化能力、葡萄糖無顯著變化，CLP模型、CLP+脂肪乳的血漿Oreyin-A顯著升高。CLP模型、CLP+胰島素的血清髓過氧化物酶顯著升高，CLP+胰島素的血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶顯著降低。CLP模型、CLP+雌二醇的肺、肝損傷較明顯，CLP+脂肪乳、CLP+胰島素顯著改善。各組肺、肝Leptin、Orexin-A蛋白表達(dá)和各臟器Leptin、Orexin-AmRNA表達(dá)的變化不一。CLP+脂肪乳的下丘腦

8、、脂肪Leptin mRNA表達(dá)顯著升高，肺、肝Leptin mRNA表達(dá)與蛋白表達(dá)均顯著降低。 上述兩部分的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：Leptin、Orexin-A在肝、腸損傷介導(dǎo)的內(nèi)環(huán)境紊亂中發(fā)生不同程度的變化，與重要臟器的結(jié)構(gòu)損傷、功能改變聯(lián)系密切。脂肪乳、胰島素顯著減輕肺、肝損傷，而雌二醇無明顯的改善作用。雖然三種干預(yù)藥物對(duì)Leptin、Orexin-A的表達(dá)水平具有不同的影響，但卻提示了Leptin、Orexin-A參與三種干預(yù)藥