厚樸酚對(duì)多囊卵巢大鼠瘦素及卵巢瘦素基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的： 觀察厚樸酚治療前后多囊卵巢模型大鼠血清瘦素、雄激素、卵泡刺激素，黃體生成素及卵巢瘦素基因(ob mRNA)表達(dá)的變化；并選用西藥二甲雙胍對(duì)照治療，比較二者療效差異，并初步探討其作用機(jī)制。 方法： 60只8周齡雌性SD大鼠在正常喂養(yǎng)4d后隨機(jī)分為模型組和空白組2組。其中空白組10只，模型組50只。除空白組外，模型組大鼠全部用于造模。從實(shí)驗(yàn)第一天起空白組給予普通飼料和正常飲水；模型組高脂飼料喂養(yǎng)，參照Pore

2、tskyL等的方法，經(jīng)皮下注射絨毛膜促性腺激素3IU及胰島素2IU，2次/天，每間隔2日早晨給藥前測(cè)大鼠體重，22天后隨機(jī)處死5只模型組，5只空白組大鼠評(píng)價(jià)造模效果，檢測(cè)卵巢形態(tài)變化和血清激素水平符合模型．即血清瘦素(Leptin)、雄激素(T)、黃體生成素(LH)均較空白組明顯升高，且LH/FSH≥2，石蠟包埋切片后，鏡下觀察卵巢呈多囊性改變． 大鼠模型制作成功后，全部停止造模給藥，將模型組隨機(jī)分為治療組(厚樸酚)、對(duì)照組(二

3、甲雙胍)、模型組3組，每組10只，進(jìn)行治療觀察。模型組給予生理鹽水1ml/100g/d灌胃，厚樸酚治療組給予厚樸酚無水乙醇溶液1ml/100g/d(藥物濃度5mg/ml)灌胃，二甲雙胍組給予二甲雙胍水溶液1ml/100g/d(藥物濃度15mg/ml)灌胃，連續(xù)給藥3周。 于第4周末，所有動(dòng)物均于上午空腹稱取體重。頸部脫臼處死后，立即開腹從下腔靜脈抽取全血約4ml，3000轉(zhuǎn)離心7分鐘后，分離血清，做瘦素(leptin)、卵泡刺激

4、素(FSH)、黃體生成素(LH)、雄激素(T)放射免疫檢測(cè)。取材，分離雙側(cè)卵巢，行大體標(biāo)本觀察．其中一部分卵巢標(biāo)本用10％甲醛固定，每例卵巢從中間切開，石蠟包埋，切片，常規(guī)腿染色，光鏡下觀察其病理形態(tài)學(xué)改變，另一部分標(biāo)本取下后先立印丟入液氮中保存?zhèn)溆?。待?zhǔn)備就緒后用熒光定量PCR法檢測(cè)各組卵巢組織中ob mRNA的表達(dá)變化。 結(jié)果： 1、肉眼觀察PCO組大鼠雙側(cè)卵巢，與空白組比較，PCO組卵巢表面較蒼白，體積增大，無或僅

5、見少量黃體形成。鏡下見卵泡擴(kuò)張，卵母細(xì)胞或放射冠消失，顆粒細(xì)胞層數(shù)減少至2-3層，部分卵泡閉鎖(見圖1，2)。說明造模成功。 2、治療組卵巢色紅，可見到黃體。鏡下可見多個(gè)黃體及各級(jí)卵泡。卵泡囊性擴(kuò)張減少或消失，顆粒細(xì)胞層數(shù)增多，優(yōu)勢(shì)卵泡內(nèi)可見到卵泡液、卵丘(見圖3，4)。 3、模型組大鼠體重明顯高于空白組，治療組體重明顯低于模型組(P<0.05)，與西藥對(duì)照組接近，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，說明二甲雙胍和厚樸酚均能

6、增強(qiáng)或改善PCO大鼠的機(jī)能狀態(tài)(見表1)。 4、激素水平的變化模型組的血清Leptin、T、LH均較空白組明顯增高(P<0.05)，治療組與模型組相比Leptin、T、LH明顯降低(P<0.05)，對(duì)照組與模型組相比Leptin、T、 LH水平也明顯降低，但與治療組相比差異無顯著性(P>0.05)。這說明厚樸酚能夠改善PCO大鼠的血清激素水平(見表2)。 5、模型組卵巢ob mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)，治療組大鼠的卵巢ob m

7、RNA表達(dá)顯著降低。對(duì)照組大鼠卵巢ob mRNA表達(dá)也顯著降低，但略高于治療組水平。這說明厚樸酚能夠改善PCO大鼠的卵巢功能(見圖8)。 結(jié)論： 厚樸酚對(duì)PCO模型大鼠有明顯的治療作用，即能改變卵巢的大小、色澤和病理學(xué)形態(tài)、減輕肥胖模型大鼠的體重、改善其機(jī)能狀態(tài)；并能降低模型大鼠的血清激素水平(Leptin、T、LH)及卵巢ob mRNA的表達(dá)，且療效類似于常用西藥二甲雙胍。 厚樸酚對(duì)PCO模型大鼠的治療作用可能