聚乳酸-聚乙二醇（PLA-PEG）納米粒子表面功能化及其腦膠質瘤靶向研究.pdf

1、本文以酰氯化方法合成了單端生物素化的聚乙二醇，利用1H—NMR對其進行驗證。考察了不同生物素與PEG之比對產物中單端生物素化聚乙二醇含量的影響，結果表明：生物素/PEG摩爾比為3/2時為最佳比例。利用生物素化的聚乙二醇與丙交酯合成了五種不同相對分子質量的PLA-PEG-B嵌段共聚物，以1H-NMR、13C-NMR和GPC對產物進行了表征，驗證了PLA-PEG-B的結構，并利用峰面積積分計算PLA-PEG-B嵌段共聚物的相對分子質量分別為

2、12.9、16.0、20.6、24.8、38.0KD。 利用PLA-PEG-B嵌段共聚物，采用納米沉淀方法制備了PLA-PEG-B納米粒子。以透射電子顯微鏡，動態(tài)光散射和Zeta電位等手段對粒子的形貌、粒徑以及表面荷電性進行了表征。結果表明：納米粒子成規(guī)則的球狀，粒度均一且分散性良好，粒徑均在100nm以下，納米粒子的粒徑隨相對分子質量的增加而逐漸增加；隨著嵌段共聚物中PLA鏈段的增加，粒子的Zeta電位值降低(-16.7mV～

3、-23.4mV)，但均大于PLA微球的Zeta電位值(-35.3mV)。利用熒光標記方法和酶聯(lián)免疫方法驗證了PLA-PEG-B納米粒子具有較強的配體結合能力。 以轉鐵蛋白作為靶向因子對PLA-PEG-B納米粒子表面進行生物功能化。以DiI為熒光染料對納米微粒進行熒光標記。利用熒光倒置顯微鏡下對所得的納米粒子進入細胞的過程進行了跟蹤研究。研究表明：PLA-PEG-B-Tf納米粒子1h時附著在細胞上，2h時已進入細胞，且隨時間增加，

4、細胞內的納米粒子越來越多，至16h時納米粒子清楚地顯示出細胞輪廓。PLA-PEG-B-Tf的細胞吞噬速率明顯快于PLA-PEG-B納米粒。 以顱內荷膠質瘤的SD大鼠為動物模型，通過尾靜脈注射考察PLA-PEG-B-Tf納米粒子在大鼠體內的分布及腦膠質瘤靶向性。研究表明：PLA-PEG-B-Tf納米粒子注入大鼠體內24h后，大部分被肝、脾攝取，但比PLA-PEG-B納米粒子被肝、脾的攝取量明顯要少。而且在腦瘤部位發(fā)現(xiàn)納米粒子的存在