靶向性載藥單氧基聚乙二醇-聚乳酸納米緩釋系統(tǒng)的制備與抗癌效果研究.pdf

1、葉酸受體在病變組織的癌細(xì)胞表面過度表達(dá)，以葉酸（FA)作為靶向分子而介導(dǎo)的藥物緩釋系統(tǒng)已經(jīng)成為當(dāng)今癌癥治療手段的研究熱點(diǎn)。本課題選擇單甲氧基聚乙二醇-聚乳酸(MPEG-PLA)作為載體原料，F(xiàn)A為腫瘤靶向分子，采用活性酯合成法制備單甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-葉酸(MPEG-PLA-FA)偶合物，選取羥基喜樹堿(HCPT)作為模型抗腫瘤藥物，通過透析法自組裝形成負(fù)載HCPT的MPEG-PLA-FA納米粒子(HCPT-MPEG-PLA-FA

2、NPs)，并采用同樣的方法制備HCPT-MPEG-PLA NPs作為實(shí)驗(yàn)對照。本課題考察單因素對實(shí)驗(yàn)條件的影響，選用不同溶劑、透析袋截留分子量(MWCO)、聚合物濃度和投料質(zhì)量比。采用掃描電鏡、粒徑分析儀、紅外吸收光譜和X-射線衍射對偶合物結(jié)構(gòu)及HCPT-MPEG-PLA NPs進(jìn)行表征;體外考察其釋藥曲線;采用人宮頸癌細(xì)胞HeLa細(xì)胞對HCPT-MPEG-PLA-FA NPs的細(xì)胞攝取和細(xì)胞毒性進(jìn)行研究;建立H22小鼠肝癌模型，對HC

3、PT-MPEG-PLA-FA NPs的體內(nèi)分布和抗癌效果進(jìn)行研究。
　　本實(shí)驗(yàn)制備的HCPT-MPEG-PLA-FA NPs為實(shí)心球形殼核結(jié)構(gòu)，平均粒徑為230.4 nm，PDI為0.036，載藥量為8.233％，包封率為67.7％。通過紅外光譜和XRD衍射圖譜分析可知，HCPT在HCPT-MPEG-PLA-FA NPs中以無定形狀態(tài)存在。HCPT-MPEG-PLA-FA NPs在體外不同pH條件下的釋藥情況表現(xiàn)出突釋和緩釋的雙相

4、特征。當(dāng)pH值升高時(shí)，納米粒子中藥物的釋放速率加快。
　　MTT試驗(yàn)表明:HCPT-MPEG-PLA-FA NPs組和HCPT-MPEG-PLA NPs組對Hela細(xì)胞均有一定程度的殺傷作用，且均具有藥物濃度依賴性。其中HCPT-MPEG-PLA-FA NPs組對Hela細(xì)胞的毒性作用效果更明顯。通過激光共聚焦熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，HCPT-MPEG-PLA-FA NPs的細(xì)胞攝取情況優(yōu)于對照組。這證明了HCPT-MPEG-PLA-

5、FA NPs可以更有效地被Hela細(xì)胞攝取，具有腫瘤細(xì)胞主動靶向性能。
　　本文最后通過活體熒光檢測和體內(nèi)器官分布實(shí)驗(yàn)，研究了荷瘤小鼠經(jīng)腫瘤局部注射后，小鼠器官中HCPT-MPEG-PLA-FA NPs的分布和抑瘤率，結(jié)果發(fā)現(xiàn):HCPT-MPEG-PLA-FA NPs相比對照組在活體內(nèi)的靶向效果更加明顯，且在肝腎器官的積累量較少。說明HCPT-MPEG-PLA-FA NPs具有較好的腫瘤靶向性且對其他正常組織器官影響較小。通過腫瘤