利用兩種遺傳轉(zhuǎn)化方法獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆的研究.pdf

1、大豆起源于中國，近年來卻由于各種原因國內(nèi)大豆在國際市場的競爭力不斷下降。導(dǎo)致我國大豆產(chǎn)業(yè)陷入困境的一個(gè)關(guān)鍵因素就是草害，在我國約有80％的大豆田受到不同程度的草害，即便是受到中等程度草害的大豆田也占全國大豆田總面積的一半以上，每年我國因草害而損失的大豆占到全國大豆總產(chǎn)量的15%。近些年隨著基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展，一些具有更強(qiáng)除草劑抗性的基因逐漸被發(fā)掘出來，抗除草劑轉(zhuǎn)基因大豆的出現(xiàn)為解決大豆田草害問題提供了新的轉(zhuǎn)機(jī)。
　　本試驗(yàn)首先

2、研究了綏農(nóng)22、綏育06-8790、黑農(nóng)61、合豐25、合豐35五個(gè)大豆品種的胚尖再生能力。試驗(yàn)結(jié)果表明，大豆胚尖不定芽誘導(dǎo)率在品種間存在差異，其中黑農(nóng)61胚尖不定芽誘導(dǎo)率最高，達(dá)82.85%；綏農(nóng)22胚尖不定芽誘導(dǎo)率最低，僅為46.64%。大豆各品種的胚尖不定芽芽數(shù)也不盡相同，其中綏農(nóng)22最高，平均芽數(shù)為1.67個(gè)；其次為黑農(nóng)61，為1.35個(gè)；平均芽數(shù)最少的是合豐25，為0.63個(gè)。用不定芽誘導(dǎo)率與芽數(shù)兩個(gè)性狀綜合評(píng)價(jià)各品種胚尖的再

3、生能力，發(fā)現(xiàn)黑農(nóng)61胚尖再生能力較強(qiáng)。此外，還進(jìn)行了胚尖在不定芽再生過程中對(duì)草甘膦的耐受濃度試驗(yàn)，結(jié)果表明在不定芽伸長階段，綏農(nóng)22、合豐25胚尖草甘膦適宜的篩選壓為7.5mg·L-1，合豐35、綏育06-8790胚尖草甘膦適宜篩選壓為10.0mg·L-1，黑農(nóng)61胚尖草甘膦適宜篩選壓為15.0mg·L-1。本試驗(yàn)利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法對(duì)大豆5個(gè)品種胚尖進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化，T0代PCR檢測到12株具有目的基因條帶的轉(zhuǎn)基因大豆植株。
　　本試