2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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1、本研究根據(jù)草甘膦氧化還原酶GOX基因的序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物,以轉(zhuǎn)基因抗除草劑油菜的總DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,克隆出GOX基因全長(zhǎng)編碼區(qū),長(zhǎng)度為1296bp。將此基因插入含有啟動(dòng)子CaMV35S與終止子NOS序列的pPZP221中,構(gòu)建植物表達(dá)載體pPZP221-GOX。以甘藍(lán)型油菜區(qū)試00S-76,太空3-19,繁4,繁5四種材料為受體,以植物表達(dá)載體pPZP221-GOX為外源基因供體,進(jìn)行了花粉管通道法轉(zhuǎn)基因研究。在授粉后20h,2

2、4h,30h,采用不切柱頭和切去柱頭上端1/3部分的2種方法,立即在柱頭上滴加質(zhì)粒DNA溶液,成熟后收獲轉(zhuǎn)化種子。對(duì)T0代植株進(jìn)行PCR檢測(cè),結(jié)果表明授粉后20h、24h和30h導(dǎo)入所獲得的陽性率分別為1.1％、3.2％和1.4％。不同處理方法比較結(jié)果表明,切去1/3柱頭后導(dǎo)入所獲得的陽性率較高,達(dá)到3.0％,而未切去柱頭,其陽性率為1.0％。為了鑒定T0代植株的抗性,經(jīng)160mg/L慶大霉素和0.02％草甘膦篩選培養(yǎng),分別得到0.7％

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