蛋白質(zhì)溶液的膜結(jié)晶.pdf

1、膜蒸餾與結(jié)晶技術(shù)的耦合過程-膜結(jié)晶，作為一種新型的分離技術(shù)適應(yīng)時代的需要應(yīng)運而生。其基本的原理是通過膜蒸餾來脫除溶液中的水，濃縮溶液，使溶液達到過飽和并通過膜表面的誘導作用而形成晶體。與常規(guī)結(jié)晶技術(shù)相比，膜結(jié)晶具有過程可控、結(jié)晶誘導時間短、初始蛋白濃度低、成核難度低等優(yōu)點。用膜結(jié)晶技術(shù)結(jié)晶蛋白質(zhì)溶液可得到適合X-射線衍射分析的大分子蛋白質(zhì)晶體，從而有利于了解蛋白質(zhì)的生物活性或設(shè)計在病理學中有特殊靶點的新型藥物，這對蛋白質(zhì)與酶的科學研究有

2、著重要的意義。本文用膜結(jié)晶技術(shù)對溶菌酶和卵清蛋白的結(jié)晶條件進行了實驗研究。主要工作如下：
　　 1、在溶菌酶溶液膜結(jié)晶的實驗研究過程中，在用靜態(tài)膜結(jié)晶法考察結(jié)晶劑種類對溶菌酶膜結(jié)晶影響的基礎(chǔ)上，用動態(tài)膜結(jié)晶法考察了結(jié)晶劑濃度、洗脫劑濃度、溶菌酶濃度、pH值、溫度、洗脫液流速、添加劑種類及PEG類化合物作為添加劑對溶菌酶晶形和膜通量的影響，對結(jié)晶條件進行了優(yōu)化，得到了質(zhì)量較高的溶菌酶晶體。結(jié)果表明，溶菌酶濃度在20～30mg/mL

3、、結(jié)晶劑NaCl濃度在4％～9％、洗脫劑MgCl2濃度在16％～25％、pH值在4.7～8.2、溫度在15℃左右、洗脫劑的流速為0.521mL/min的條件下能夠得到高質(zhì)量的溶菌酶晶體，以NaCl作為結(jié)晶劑，加入PEG類化合物或酒石酸鈉鉀作為添加劑能夠有效改善晶體的形狀及大??；
　　 2、在卵清蛋白溶液膜結(jié)晶的實驗研究過程中，用靜態(tài)膜結(jié)晶法初步探索了不同溶劑、不同pH值、不同結(jié)晶劑種類及濃度、不同洗脫液濃度對卵清蛋白溶液膜結(jié)晶的