人肺癌相關(guān)抗原ALT04ag基因的分子克隆、生物信息分析及其功能的初步研究.pdf

1、ALT-04是該研究室建立的一株具有較高特異性的抗人肺癌單抗,已成功用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)的腫瘤呈像.此后我們克隆了該肺癌相關(guān)抗原ALT04ag的部分cDNA片段并證明是一新的cDNA序列,該片段具有一定的轉(zhuǎn)化活性.該文目的于進(jìn)一步克隆ALT04ag cDNA全長(zhǎng),對(duì)其結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行初步分析,以期為腫瘤發(fā)生、發(fā)展機(jī)理的研究提供有用的線索.該文的研究工作主要分以下幾方面:1、用5'RACE法克隆了ALT04ag cDNA全長(zhǎng),以生物信息學(xué)方法對(duì)

2、其進(jìn)行同源性、分子量、蛋白跨膜區(qū)、功能位點(diǎn)、等電點(diǎn)、親疏水性、蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)、抗原決定簇等項(xiàng)的分析和預(yù)測(cè).2、構(gòu)建ALT04ag cDNA真核表達(dá)質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染正常小鼠成纖維細(xì)胞C3H1OT<,1/2>.3、構(gòu)建反義ALT04ag cDNA真核表達(dá)質(zhì)粒以此轉(zhuǎn)染人肺鱗癌細(xì)胞L78,穩(wěn)定整合后引起細(xì)胞生長(zhǎng)抑制、成瘤性喪失.4、以DFMO處理人肺鱗癌細(xì)胞L78后抑制細(xì)胞生長(zhǎng),誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡.5、比較反義ALT04ag cDNA轉(zhuǎn)染的DFMO處理的L7