CD40基因多態(tài)性與急性冠脈綜合征易感相關(guān)性研究.pdf

1、急性冠脈綜合征(ACS)是由于冠狀動(dòng)脈不穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化(AS)斑塊破裂繼發(fā)血栓形成，導(dǎo)致管腔嚴(yán)重狹窄或閉塞引起急性或亞急性心肌缺血的臨床綜合征。包括不穩(wěn)定心絞痛、ST段抬高的心肌梗死和非ST段抬高心肌梗死。眾多資料顯示：ACS患病率逐年的增高，目前已成為心血管疾病的“頭號(hào)無聲殺手”。隨著對(duì)ACS發(fā)生機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷深入，對(duì)ACS規(guī)范化治療的逐步完善，特別是近幾年加強(qiáng)了抗血小板、穩(wěn)定斑塊措施以及早期的介入治療使該綜合征的死亡率明顯降低。眾

2、多的研究顯示，AS斑塊局部的免疫介導(dǎo)、炎癥反應(yīng)和血栓形成是導(dǎo)致ACS發(fā)生、發(fā)勝的中心環(huán)節(jié)，斑塊的穩(wěn)定性是影響ACS發(fā)生、發(fā)展的主要決定性因素。斑塊中各種炎癥因子和細(xì)胞因子的相互作用加速斑塊的形成和破裂，其中CD40—CD40配體相互作用甚是引起人們的重視。它們是一對(duì)互補(bǔ)的受體—配體細(xì)胞跨膜糖蛋白，屬于腫瘤壞死因子受體(TNFR)和TNFR超家族成員，在體液免疫和細(xì)胞免疫中傳遞重要的細(xì)胞信號(hào)通路。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，這一對(duì)受體—配體軸的表達(dá)

3、和相互作用參與了AS斑塊的發(fā)生、發(fā)展并進(jìn)一步激活血小板，在ACS的發(fā)生中起關(guān)鍵作用，逐漸受到國(guó)內(nèi)、外學(xué)者關(guān)注。CD40—CD40L基因突變或表達(dá)異常與某些炎癥反應(yīng)，自身免疫性疾病和免疫缺陷病的發(fā)生密切相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)CD40基因啟動(dòng)子區(qū)域-1位C/T與CD40蛋白的表達(dá)有關(guān)，與眾多免疫炎癥性疾病相關(guān)。 本實(shí)驗(yàn)在原有的工作基礎(chǔ)上采用聚合酶鏈反應(yīng)—限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR—RFLP)技術(shù)檢測(cè)了ACS患者、穩(wěn)定型心絞痛患者(SA)

4、及冠脈正常者CD40-1C/T基因多態(tài)性并測(cè)序鑒定，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血單核細(xì)胞表達(dá)CD40水平，探討CD40基因啟動(dòng)子區(qū)域-1C/T單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(SNP)與急性冠脈綜合征(ACS)的易感相關(guān)性，并結(jié)合血單核細(xì)胞表達(dá)CD40水平，探討其機(jī)制是否與基因位點(diǎn)的改變引起下游蛋白的改變，從而增加疾病的易患風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)ACS患者CC基因型及C等位基因頻率均明顯高于SA患者及對(duì)照組(32.3％vs19.5％vs15.6；58.7％vs4

5、7.2％vs41.8％)，而TT基因型和T等位基因頻率明顯低于SA和對(duì)照組(14.8％vs25.1％vs32.0％；41.3％vs52.8％vs58.2％)。基因型及等位基因頻率在SA組與對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。C等位基因的攜帶者ACS的患病風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)SA增加了1.841倍(OR=1.841，95％CI：1.390-2.437)，相對(duì)于對(duì)照組患病風(fēng)險(xiǎn)增加了1.877倍(OR=1.877，95％CI：1.402-2.515)。各組外周血單核細(xì)胞

6、CD40表達(dá)的平均熒光強(qiáng)度分別為(24.8±7.6，25.4±9.1，65.6±15.4)，其中ACS組明顯高于SA組及對(duì)照組，而SA組和對(duì)照組無顯著差異。ACS組中各基因型CD40表達(dá)分別為(74.6±8.7，56.8±6.7，46.3±9.8)，CC基因型患者單核細(xì)胞CD40的表達(dá)高于CT型及TT型，CT基因型高于TT基因型。CD40基因啟動(dòng)子區(qū)域的-1C/T單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點(diǎn)，C等位基因明顯增加了ACS的患病風(fēng)險(xiǎn)，其機(jī)制

7、可能與其增加了CD40蛋白的表達(dá)有關(guān)。 近幾年人們認(rèn)識(shí)到，決定ACS的因素不是粥樣斑塊的數(shù)量、分布和大小，而是外在觸發(fā)因素和斑塊內(nèi)在特性相互作用導(dǎo)致斑塊破裂的結(jié)局。冠狀動(dòng)脈造影提示約有半數(shù)急性血栓病變其狹窄程度僅為輕度或中度，ACS的發(fā)生與冠脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定性有關(guān)，而與冠脈的狹窄程度無關(guān)。如何早期預(yù)測(cè)不穩(wěn)定斑塊，早期采取干預(yù)手段，減少急性心血管事件的發(fā)生成為目前研究的熱點(diǎn)。冠脈造影結(jié)果顯示冠脈粥樣硬化呈現(xiàn)復(fù)雜狹窄較光滑狹窄

8、可更迅速發(fā)展，甚至發(fā)生完全閉塞病變，提示斑塊不穩(wěn)定。 本實(shí)驗(yàn)在揭示CD40-1C/T多態(tài)性與ACS關(guān)系的基礎(chǔ)上，結(jié)合冠脈造影結(jié)果分析CD40-1C/T基因多態(tài)性與冠脈復(fù)雜狹窄的關(guān)系，進(jìn)一步探討其與不穩(wěn)定斑塊的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：復(fù)雜狹窄組CC基因型頻率明顯高于光滑狹窄組及對(duì)照組(29.4％ vs15.3％ vs15.6％)，同時(shí)TT基因型明顯低于光滑狹窄組和對(duì)照組(16.9％ vs29.0％32.0％)。復(fù)雜狹窄組的C等位基因頻率明

9、顯高于光滑狹窄組和對(duì)照組(56.2％ vs43.1％ vs41.8％)。C等位基因與斑塊的形態(tài)明顯相關(guān)，增加了復(fù)雜狹窄的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)(較光滑狹窄組相比OR=1.69795％CI：1.273-2.261；較對(duì)照組相比OR=1.79395％CI：1.410-2.281)。而基因型及等位基因頻率在光滑狹窄組和對(duì)照組之間無顯著差異。CD40基因啟動(dòng)子區(qū)域的-1C/T單核苷酸多態(tài)性(SNP)位點(diǎn)與冠脈斑塊的不穩(wěn)定性相關(guān)，C等位基因明顯增加了斑塊的易損