大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞三種移植途徑在急性腎梗阻模型中的歸巢研究.pdf

1、目的:急性腎梗阻是泌尿外科常見病，若治療不及時(shí)，則向腎臟間質(zhì)纖維化方向發(fā)展，導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的病理改變，最終結(jié)局為終末期腎衰竭。近年來間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)作為研究治療腎臟疾病的一種新手段，已取得突破性進(jìn)展。然而MSCs移植目前尚沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，而不同移植方式影響MSCs的歸巢，同時(shí)歸巢又是MSCs發(fā)揮治療作用的重要環(huán)節(jié)。因此我們通過可復(fù)性左側(cè)輸尿管梗阻的大鼠模型來模擬臨床急性腎梗阻的病變，采用

2、經(jīng)腎動(dòng)脈、尾靜脈、包膜下三種方式移植熒光標(biāo)記的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(DiRlabeled bone marrow-derived MSCs，DiR-BM-MSCs)，結(jié)合小動(dòng)物活體成像技術(shù)(in vivo imaging system，MS)對(duì)細(xì)胞在體內(nèi)的歸巢情況進(jìn)行觀察、比較及評(píng)價(jià)，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究及臨床應(yīng)用提供參考。
　　 創(chuàng)新點(diǎn):1、目前尚沒有關(guān)于此三種移植方式歸巢效率的評(píng)價(jià)研究;2、采用IVIS直觀觀察DiR-BM-MSCs的

3、歸巢過程。
　　 方法:1、4W齡雌性SD大鼠，SPF級(jí)，30只。隨機(jī)數(shù)字表法分為三個(gè)組:腎動(dòng)脈組、尾靜脈組和包膜下組，每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各5只大鼠;2、復(fù)蘇傳代大鼠BM-MSCs，并進(jìn)行熒光染色;3、建立可復(fù)性左側(cè)輸尿管梗阻模型(reversable unilateral ureteral obstruction，R-UUO);4、三個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別經(jīng)腎動(dòng)脈、尾靜脈、包膜下移植DiR-BM-MSCs;5、移植后1h、48h采用IVIS

4、檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組在體和離體臟器的歸巢情況。
　　 結(jié)果:1、復(fù)蘇傳代后的SD大鼠BM-MSCs狀態(tài)良好，經(jīng)熒光染料染色后發(fā)光效果穩(wěn)定，隨細(xì)胞濃度的增加，熒光強(qiáng)度與其成相關(guān)性增加;2、成功建立了大鼠可復(fù)性單側(cè)輸尿管梗阻模型，提高了模型的均衡性和穩(wěn)定性;3、建立并完善了三種移植方式的技術(shù)內(nèi)容;4、靜脈移植組中MSCs在左側(cè)受損腎臟的歸巢率大于右側(cè)正常腎臟(P＜0.05);5、MSCs不同移植方式在梗阻側(cè)腎臟的早期歸巢率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜