乳酸菌和大腸桿菌對(duì)固定化犬腸道粘蛋白模型的粘附性研究.pdf

1、本研究采用雙層瓊脂法測(cè)定了兩株犬源乳酸菌E01和E16對(duì)兩株致病性人腸桿菌ATCC25922和CVCC2060的抑菌效果，其抑菌圈的大小范圍為13mm-16mm左右。其中乳酸菌E01對(duì)人腸桿菌CVCC25922抑菌效果最好，抑菌圈直徑為16.67mm。結(jié)合生化試驗(yàn)和細(xì)菌16SrDNA片段序列結(jié)果，鑒定犬源乳酸菌E01為耐久腸球菌(相似率97％)，E16為乳酸腸球菌(相似率99％)。 采用固定粘蛋白模型，結(jié)合同位素γ-32p-AT

2、P標(biāo)記細(xì)菌法，檢測(cè)犬源耐久腸球菌E01和乳酸腸球菌E16、犬源人腸桿菌DE、雞源德氏乳酸桿菌德氏亞種N11及豬源約氏乳桿菌JJB3和致病性人腸桿菌ATCC25922和CVCC2060對(duì)中華田園犬幼犬各腸段粘液蛋白的粘附能力，結(jié)果所有測(cè)試菌株均能不同程度地枯附犬十二指腸、空腸、同腸、盲腸和結(jié)腸粘蛋白，而且對(duì)不同腸段粘蛋白模型的粘附率不相同。其中耐久腸球菌E01粘附率最高，達(dá)15.60-25.71％；大腸桿菌CVCC2060粘附率最低，為2

3、.88-5.74％。兩株致病性大腸桿菌ATCC25922和CVCC2060在各腸段的粘附率都低于四株乳酸菌E01、E16、JJB3和N11。 以高碘酸鈉和胰蛋白酶分別修飾犬源乳酸腸球菌E16和犬源大腸桿菌DE，探究其各自粘附機(jī)制；另外以兩種處理方式分別修飾粘蛋白后進(jìn)行粘附實(shí)驗(yàn)，探究其各自粘附受體。兩種處理方式均使乳酸腸球菌E16的粘附比率顯著降低(P＜0.05)，大腸桿菌DE經(jīng)胰蜇白酶處理后，粘附率也降低，但經(jīng)高碘酸鈉處理后粘附

4、率無(wú)明顯變化。說(shuō)明乳酸腸球菌E16表面的碳水化合物結(jié)構(gòu)和糖蛋白參與了粘附過(guò)程，大腸桿菌菌體蛋白在粘附過(guò)程中發(fā)揮一定作用。粘蛋白經(jīng)胰蛋白酶修飾后，對(duì)乳酸腸球菌E16和大腸桿菌DE的粘附性均無(wú)影響，經(jīng)高碘酸鈉處理后對(duì)乳酸腸球菌E16粘附性無(wú)影響，但大腸桿菌DE的粘附率顯著降低(P＜0.05)。結(jié)果說(shuō)明乳酸腸球菌的粘附受體對(duì)這兩種試劑處理不敏感，大腸桿菌DE的粘附受體具有碳水化合物結(jié)構(gòu)，可能為糖蛋白類物質(zhì)。 最后分別采用排斥、競(jìng)爭(zhēng)和取