離子液體分散液相微萃取對復雜樣品中苯丙烯酸類化合物的濃縮、富集及色譜分析.pdf

1、目的：利用離子液體分散液相微萃取法(ionicliquiddispersiveliquidphasemicroextraction，ILDLPME)對體內(nèi)外復雜樣品中5種苯丙烯酸類化合物的萃取行為進行了分析和研究；建立了以ILDLPME為復雜樣品前處理技術結合高效液相色譜法快速測定了微量苯丙烯酸類化合物的方法，對不同產(chǎn)地白附子的質(zhì)量進行比較和評價。揭示和討論咖啡酸以及其代謝產(chǎn)物在大鼠尿液中的分布及濃度和生物體內(nèi)的可能轉(zhuǎn)化過程。
　

2、　 方法：優(yōu)化分析物的微萃取條件，在10ml具塞尖底離心管中，加入1.6ml對照品溶液或供試品溶液，80mg[Hmim][PF6]萃取溶劑,500μl四氫呋喃(THF)分散劑，0.1mol/LHCl溶液80μl，用175g/L的NaCl稀釋至8.0ml(此時樣品相的pH為3)。充分振蕩后形成了水/分散劑/萃取劑白色云霧狀的混濁體系。在3500r/min下離心5min，在離心管底部形成萃取劑液滴聚集相。用微量進樣器抽取聚集相液滴20μl

3、，置于5ml的小燒杯中，用40μl甲醇溶解，取20μl進行高效液相色譜分析。色譜分離條件EclipseXDB-C18柱(5μm，150mm×4.6mmi.d.AgilentTechnologies),檢測波長：300nm，柱溫：37℃，進樣量20μl，流動相0.2％磷酸(A)-甲醇(B)，用0.45μm微孔濾膜過濾。梯度洗脫：0→4→5→12→22min:78％:22％(1.0ml/min)→72％:28％(1.0ml/min)→65％

4、:35％(1.0ml/min)→65％:35％(1.1ml/min)。
　　 結果：水樣基質(zhì)：在最佳的ILDLPME-HPLC條件下，在最佳的ILDLPME-HPLC條件下，測得咖啡酸的線性范圍為1.28×10-3～2.60μg/ml，對羥基桂皮酸、阿魏酸的線性范圍為1.28×10-4～2.60μg/ml，桂皮酸、對甲氧基桂皮酸的線性范圍為1.28×10-3～4.00μg/ml;檢測限分別為：0.13、0.01、0.01、0.1

5、3、0.13ng/mL;日內(nèi)RSD＜7.9％、日間精密度RSD＜9.7％;藥材中分析物的回收率在86.9％～112.6％之間；ILDLPME對5種分析物的富集倍數(shù)分別在56～159.3倍之間。
　　 尿樣基質(zhì)：在最佳的ILDLPME-HPLC條件下，測得咖啡酸、對羥基桂皮酸、阿魏酸、桂皮酸的線性范圍為1.28×10-2～4.00μg/ml，對甲氧基桂皮酸的線性范圍為1.28×10-3～4.00μg/ml;檢測限分別為：1.3、0

6、.13、1.3、1.3、0.13ng/mL;日內(nèi)精密度RSD＜8.9％，日間精密度RSD＜9.5％;尿液中尿液中咖啡酸、對羥基桂皮酸、阿魏酸、桂皮酸、對甲氧基桂皮酸的平均回收率在97.1％～110.5％之間；
　　 結論：在條件優(yōu)化的基礎上，結合5種苯丙烯酸類化合物ILDLPME萃取前后紫外光譜的特征，提出了ILDLPME萃取苯丙烯酸羧基-離子液體電荷轉(zhuǎn)移超分子(CTSMCIL)機理。本法的研究為建立中藥白附子科學的質(zhì)量控制方法