局部滴用潔爾滅防腐劑建立兔干眼模型.pdf

1、本文探討了局部滴用潔爾滅防腐劑建立兔干眼模型并初步探討防腐劑對兔眼表造成損害的作用機制。 方法： 隨機選取一眼為實驗眼滴用0.1﹪潔爾滅滴眼液(BAC組)2周，每天2次，對側眼為空白對照組((Control組)。分別于給藥前及給藥后第3、5、7、14天行雙眼Schirmer。試驗、熒光素鈉染色(FL)、虎紅染色(RB)，給藥前及給藥后第7、14天行結膜細胞印跡學檢查，用藥后第14天處死兔子取結膜冰凍切片標本行免疫熒光檢測

2、粘蛋白MUC5AC分布情況，取結膜及角膜行石蠟切片檢查、掃描及透射電鏡檢查。Schirmer試驗濾紙濕長及杯狀細胞計數(shù)差異采用配對student'st-test，F(xiàn)L染色和RB染色評分差異采用wilcoxorl siqned rank test進行統(tǒng)計學處理，設p<0.05為有統(tǒng)計學差異。 結果： 給藥前，BAC組及對照組各項檢查無顯著差異。與對照組相比，給藥后第5天起實驗組Schirmer試驗濾紙濕長減少(p=0.0

3、09)并逐漸下降；第5天起FL染色計分增加(p=0.000)并逐漸上升；第3天起RB染色計分增加(p=0.000)并逐漸上升；第7天起杯狀細胞密度下降(p=0.000)并逐漸下降，結膜上皮細胞增大、扁平及多型性、核變小、核漿比由1∶2變化為1∶4-1∶5；第14天免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)BAC組MLIC5AC分布較對照組明顯減少；光鏡檢查發(fā)現(xiàn)BAC組部分角膜上皮層數(shù)減少、部分結膜上皮層數(shù)減少、杯狀細胞減少；掃描電鏡檢查發(fā)現(xiàn)角膜上皮微絨毛減少，透

4、射電鏡檢查發(fā)現(xiàn)膜上皮微絨毛減少、角膜上皮細胞器腫脹、結膜杯狀細胞分泌顆粒大量減少。 結論： 1.局部應用潔爾滅防腐劑建立的兔干眼模型，既表現(xiàn)為粘蛋白缺乏型干眼病改變，又有水液缺乏型干眼病的體征，符合人類干眼病發(fā)病過程及眼表損害表現(xiàn)。 2.結膜杯狀細胞及MUC5AC的明顯減少使該模型成為研究粘蛋白減少型干眼癥發(fā)病機制及治療的理想模型。 3.0.1﹪潔爾滅引起干眼癥的損害機制，可能是由于潔爾滅破壞杯狀細胞分泌