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文檔簡介
1、利用基因編輯技術可以實現(xiàn)多基因調控并培育轉基因動物新品種。本研究利用CRISPR/Cas9技術,將肌肉特異性雙向共表達打靶載體5arm-shRNA-MRF4-MRF4-hFAD3-3arm(MSTN siRNA-hFAD3)定點整合入已證明的安全整合位點NCAPG-LCORL位點。研究MSTN siRNA-hFAD3表達對肌肉和脂肪酸相關基因的表達及n3多不飽和脂肪酸含量的影響,以期達到既促進肌肉發(fā)育,同時增加肌肉中n-3多不飽和脂肪酸
2、,有效改善肉質、提高肉量的目的。結果表明:(1)CRISPR/Cas9成功介導MSTN siRNA-hFAD3肌肉特異性雙向共表達載體在NCAPG-LCORL位點定點整合入牛細胞基因組。(2)MSTN siRNA-hFAD3基因的表達在細胞水平顯示一定的肌肉特異性。(3)在定點整合的牛胎兒成纖維細胞及肌肉衛(wèi)星細胞中,脂肪相關基因的表達結果顯示,脂肪合成與脂肪分解的平衡向脂肪分解方向移動;肌肉發(fā)育相關基因表達量均上調;n6/n3比值均下降
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