肌肉特異性microRNAs在Duchenne型肌營(yíng)養(yǎng)不良全血中的表達(dá).pdf

1、研究背景：
　　Duchenne型肌營(yíng)養(yǎng)不良（Duchenne muscular dystrophy，DMD）是最常見的肌營(yíng)養(yǎng)不良類型，屬于X染色體隱性遺傳病，由位于Xp21片段上的抗肌肉萎縮蛋白（dystrophin）基因突變而致骨骼肌肌膜上dystrophin缺失引起。目前，DMD的診斷主要依靠臨床表現(xiàn)、血清肌酸激酶（creatine kinase，CK）、肌肉病理與免疫組化、基因檢測(cè)等，但血清CK值容易受應(yīng)激、感染、損傷等多

2、種因素的影響，且診斷的特異性較差；肌肉病理與免疫組化屬于有創(chuàng)性檢查，而基因檢測(cè)所需費(fèi)用較高。因此，探尋診斷DMD的非侵入性、穩(wěn)定的新型生物標(biāo)志物具有重要意義。MicroRNAs（miRNAs/miRs）是一類約含有19～25個(gè)核苷酸（nucleotide,nt）的非編碼單鏈微小RNA，在人類基因組中，大約有30％的基因受miRNAs的調(diào)節(jié)，具有高度的保守性、時(shí)序性和組織特異性。在眾多的miRNAs家族中，miR-206、miR-1、mi

3、R-133a/b屬于經(jīng)典的肌肉特異性miRNAs，它們組成進(jìn)化過程中保守的肌肉轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，在肌肉的正常生長(zhǎng)發(fā)育、能量代謝與肌肉的損傷、壞死等病理過程均發(fā)揮重要作用。近年來，外周血miRNAs已被視為多種疾病潛在的生物標(biāo)志物，如：癌癥、肝損傷、心血管疾病等，但關(guān)于循環(huán)血中miRNAs能否作為診斷DMD的研究相對(duì)較少。
　　研究目的：
　　探討全血肌肉特異性miR-206、miR-1、miR-133a/b作為診斷DMD的新型、

4、非侵入性生物標(biāo)志物的可能性，為DMD的診斷提供依據(jù)。
　　研究對(duì)象及方法：
　　收集2013年1月~2015年5月期間于鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院就診的6-17歲DMD男童24人（平均年齡8.88±2.72歲）作為DMD組；選擇家庭、經(jīng)濟(jì)條件等與實(shí)驗(yàn)組相似的6-17歲健康男童24人（平均年齡8.71±2.63歲）作為健康對(duì)照組。兩組年齡、身高、體重等均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-qPCR）技術(shù)檢測(cè)D

5、MD組與健康對(duì)照組兒童全血中肌肉特異性miRNAs的表達(dá)，采用Pearson相關(guān)分析法分析DMD組患兒肌肉特異性miRNAs與年齡、肌力與肌肉功能之間的相關(guān)性，繪制ROC曲線判斷肌肉特異性miRNAs作為DMD診斷標(biāo)準(zhǔn)的可靠性。
　　結(jié)果：
　　1.肌肉特異性miRNAs的表達(dá)情況
　　肌肉特異性miRNAs在DMD組患兒全血中的表達(dá)明顯高于對(duì)照組，兩組比較有顯著差異（P<0.05）。
　　2.肌肉特異性miRN

6、As與年齡、肌力、肌肉功能之間的相關(guān)關(guān)系（r）DMD組中肌肉特異性miRNAs在全血中的表達(dá)水平與年齡呈低度負(fù)相關(guān)（P<0.05），與肌力、肌肉功能呈中度正相關(guān)（P<0.05）。
　　3.ROC曲線結(jié)果
　　DMD組中全血肌肉特異性miRNAs的ROC曲線下面積（AUC）≥0.87，靈敏度及特異度均良好，尤以miRNA-206為著。
　　結(jié)論：
　　肌肉特異性miRNAs在DMD患者全血中的表達(dá)水平與臨床病情進(jìn)展