PPAR-γ受體激動(dòng)劑羅格列酮抗內(nèi)毒素介導(dǎo)急性肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文研究目的：探討PPARγ受體激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)LPS介導(dǎo)的急性肝損傷的影響及其對(duì)肝臟信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響。 研究方法：實(shí)驗(yàn)1.雄性昆明種小鼠54只隨機(jī)分為3組：(1)對(duì)照組(n=6)：0.9％NaCl+18％DMSO溶液，0.2 ml/只，i.p.；(2)LPS組(n=24)：LPS 5mg/kg，i.p.；(3)ROSI+LPS組(n=24)：ROSI 6mg/kg，i.P.并于給ROSI 1小時(shí)后給LPS，劑量和方法與LPS組相

2、同。各組動(dòng)物分別于注射LPS或生理鹽水/DMSO后0.5h、1.5h和6h，在戊巴比妥鈉麻醉下經(jīng)眼內(nèi)眥采血和開(kāi)腹取肝，用于血漿ALT、肝臟MDA、TNF-α、GSH含量和GSH/GSSG測(cè)定。實(shí)驗(yàn)2.雄性昆明種小鼠20只，隨機(jī)分為兩組：(1)對(duì)照組(n=10)：腹腔注射0.9％NaCl+18％DMSO溶液0.2 ml；(2)ROSI組(n=10)：ROSI 6mg/kg，i.p.。兩組動(dòng)物于腹腔注射生理鹽水/DMSO或ROSI 1小時(shí)后

3、，自小鼠尾靜脈注入按1：5稀釋的印度墨汁，測(cè)定枯否細(xì)胞吞噬指數(shù)k及其校正值α。實(shí)驗(yàn)3(1).雄性昆明種小鼠60只，隨機(jī)分為三組：(1)對(duì)照組(n=6)：腹腔注射0.9％NaCl 0.2 ml；(2)損傷組(n=30)：同實(shí)驗(yàn)一。(3)ROSI預(yù)處理組(n=24)：與實(shí)驗(yàn)一相同。前兩組小鼠于腹腔注射生理鹽水或LPS后2h、4h、6h、8h、10h，第三組小鼠于腹腔注射LPS后0.5h、1.5h、6h，在戊巴比妥鈉麻醉下開(kāi)腹取肝，用West

4、ern blotting方法檢測(cè)PPARγ。實(shí)驗(yàn)3(2).動(dòng)物分組和處理同實(shí)驗(yàn)1。分別于腹腔注射LPS或生理鹽水/DMSO后0.5h、1.5h和6h，在戊巴比妥鈉麻醉下開(kāi)腹取肝臟，用Western blotting方法檢測(cè)肝臟MEK1/2、ERK1/2、p38MAPK、STATl、STAT3、HSP 70、NF-кBP65、NF-кBP50、IкB、TLR4、CD14、IRAK-M和PPARγ的表達(dá)。 研究結(jié)果：PPARγ受體激

5、動(dòng)劑ROSI可明顯減輕LPS所致的急性肝損傷。經(jīng)ROSI預(yù)處理后動(dòng)物血漿ALT活性和肝臟MDA、GSSG含量下降，而GSH含量、GSH/GSSG比值則升高。肝勻漿的TNF-α測(cè)定結(jié)果表明，損傷組TNF-α含量明顯高于對(duì)照組，ROSI預(yù)處理組TNF-α含量明顯低于肝損傷組(p<0.01)。在LPS所致急性肝損傷中，肝臟PPARγ受體表達(dá)隨時(shí)間推移逐漸減弱。ROSI預(yù)處理可增強(qiáng)肝臟ERK1/2、p38MAPK、STAT3蛋白磷酸化以及HSP