重組人血管內(nèi)皮抑素聯(lián)合環(huán)磷酰胺節(jié)拍化療在人肺腺癌裸鼠移植瘤模型上的實驗研究.pdf

1、 1 重組人血管內(nèi)皮抑素聯(lián)合環(huán)磷酰胺節(jié)拍化療在 重組人血管內(nèi)皮抑素聯(lián)合環(huán)磷酰胺節(jié)拍化療在人肺 人肺腺癌裸鼠 腺癌裸鼠移植瘤模型上的 移植瘤模型上的實驗研究 實驗研究 中文摘要 中文摘要 目的：在人肺腺癌細胞 A549 的裸鼠皮下移植瘤模型上，考察重組人血管內(nèi)皮 抑素 (Recombinant human endostatin, Endostar, YH-16, 恩度)聯(lián)合環(huán)磷酰胺（cyclohosphamide, CTX）節(jié)拍化療（M

2、etronomic chemotherapy，MET)的療效和安全性， 并揭示其抗血管形成的機制， 以期為晚期非小細胞肺癌的維持治療提供治療方式和理論依據(jù)。 方法：1、建模和分組：建立人A549肺腺癌的裸鼠皮下移植瘤模型，并將90只成瘤鼠隨機分為5組， 即生理鹽水對照組 （CONT組） 、 恩度組 （Endostar, ES組） 、CTX節(jié)拍化療組 （CTXMET組） 、 恩度聯(lián)合CTX節(jié)拍化療組 （Endostar+CTXMET，ES

3、CTXMET組）和CTX最大耐受劑量組(CTXMTD組)。每組隨機選取5只用于機制研究，其余用于療效和生存質(zhì)量分析。藥物干預(yù)方式：Endostar以腹腔注射給藥 （4mg/kg/d） ； CTXMET通過加入到飲水中給藥[1] （CTX10mg/kg/d） ； CTXMTD以腹腔注射給藥（CTX100mg/kg/ d1,3,5; 21d/cycle）。 2、療效和安全性分析：實驗過程中，動態(tài)測定小鼠體重、腫瘤體積，記錄模型動物的死亡時間

4、以及不良事件。在第9周結(jié)束時（第1個中期分析時間窗）考察腫瘤的治療反應(yīng)（即腫瘤體積） ；在第9月結(jié)束時（第2個中期分析時間窗）進行生存分析。 3、機制研究：在藥物干預(yù)至第9周結(jié)束時，以流式細胞儀測定模型動物外周血循環(huán)內(nèi)皮細胞（circulating endothelial cells, CECs）的數(shù)目和活性（CD13、VEGFR2標記CECs[2]；7AAD標記細胞活性） ；其后，以10%福爾馬林溶液固定瘤體，免疫組化檢測腫瘤微血管密

5、度 （Microvessel density， MVD； CD31標記血管內(nèi)皮細胞） 。統(tǒng)計學(xué)分析組間的顯著性差異。 結(jié)果：1、本研究通過皮下接種A549細胞懸液可成功構(gòu)建人肺腺癌A459裸鼠皮下移植瘤模型。 2、 腫瘤體積動態(tài)觀察藥物干預(yù)組增長速度明顯小于生理鹽水對照組， 在第9周結(jié)3 節(jié)拍化療以及 CTX 節(jié)拍化療+Endostar 聯(lián)合用藥。 3、Endostar 與 CTX 節(jié)拍化療能抑制人肺腺癌細胞 A549 裸鼠移植瘤 CE

6、Cs 的數(shù)目和活性，聯(lián)合用藥有增效作用。最大劑量 CTX 給藥增加 CECs 的數(shù)目和活性。4、Endostar 與 CTX 節(jié)拍化療能減低人肺腺癌細胞 A549 裸鼠移植瘤的微血管密度，聯(lián)合用藥有增效作用。最大劑量 CTX 給藥對微血管密度無明顯影響。 5、 Endostar、 CTX-MET、以及 CTX 節(jié)拍化療+Endostar 聯(lián)合使用治療 A549 荷瘤鼠模型的毒副作用輕。最大劑量 CTX 給藥的毒性反應(yīng)明顯。 【關(guān)鍵詞】重