反義寡核苷酸對培養(yǎng)的視神經少突膠質細胞Nogo-A調控的實驗研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學碩士學位論文反義寡核苷酸對培養(yǎng)的視神經少突膠質細胞NogoA調控的實驗研究姓名：彭錫嘉申請學位級別：碩士專業(yè)：眼科學指導教師：劉少章葉劍2002.5.1、f結果：1視神經組織接種后3天，有圓形或梭形的細胞自視神經遷出；11悉生右，細胞基本鋪滿蓋玻片；GC抗體免疫組化顯示獲得的細胞為少突膠質細胞。2原位雜交顯示NogoAmRNA陽性表達的細胞胞漿呈棕黃色陽性反應，陰性對照實驗呈陰性反應。3熒光倒置顯微鏡下觀察，80％以上的細胞

2、呈綠色熒光；RT—PCR結果顯示三種濃度(21tM、5uM、10pM)的NogoA反義寡核苷酸組，Nogo—AmRNA的表達均顯著降低(PO05)。10uM以下的濃度對存活無明顯影響。Y結論：本課題建立的少突膠質細胞培養(yǎng)方法，可獲得純化的少突膠質細胞，能滿足進一步的實驗需要；少突膠質細胞表達NogoAmRNA；少突膠質細胞能直接攝取反義寡核苷酸；NogoA反義寡核苷酸可有效地、特異性地抑制靶基因的表達。lOuM以下的濃度對存活無明顯影響