S100A4反義寡核苷酸抑制神經(jīng)母細胞瘤細胞侵襲的實驗研究.pdf_第1頁
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1、方法:該研究以兩種高表達S100A4基因的神經(jīng)母細胞瘤細胞系LA-N-6和SK-N-SH為體外模型,以人S100A4 mRNA序列5'翻譯起始位點第70~89位堿基為反義作用靶點,人工合成20聚反義寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,asODN),并以其正義鏈和錯義鏈為對照,通過脂質(zhì)體包裹的方法進行細胞轉(zhuǎn)染.采用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymeras

2、e chain reaction,RT-PCR)方法在mRNA水平檢測asODN對兩種神經(jīng)母細胞瘤細胞S100A4表達的抑制作用和對MMP-2表達的影響,以比色法檢測asODN對兩種神經(jīng)母細胞瘤細胞的細胞活力的影響,以Transwell濾膜小室法檢測神經(jīng)母細胞瘤細胞體外侵襲和運動能力.結(jié)論:脂質(zhì)體介導(dǎo)的S100A4反義寡核苷酸能夠抑制神經(jīng)母細胞瘤LA-N-6和SK-N-SH細胞中S100A4 mRNA表達,抑制LA-N-6細胞體外侵襲能

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