云芝氯仿萃取物對(duì)肝癌 HepG-2 細(xì)胞的凋亡作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討云芝氯仿萃取物對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞的凋亡作用及其作用機(jī)制。
　　方法：以人肝癌細(xì)胞HepG-2為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，用不同濃度的云芝氯仿萃取物處理不同時(shí)間后，MTT Assay方法檢測云芝氯仿萃取物對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞生存抑制率的影響；細(xì)胞HE染色方法觀察云芝氯仿萃取物對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；DNA ladder方法檢測云芝氯仿萃取物對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞DNA片段的影響；蛋白免疫印記（Western Blottin

2、g）方法檢測云芝氯仿萃取物對(duì)肝癌HepG-2細(xì)胞的Bax、Bcl-2及 Caspase-3蛋白表達(dá)的影響；從而探討云芝氯仿萃取物對(duì) HepG-2細(xì)胞的作用及機(jī)制。
　　結(jié)果：云芝氯仿萃取物可以促進(jìn)肝癌HepG2的凋亡。MTT結(jié)果顯示，云芝氯仿萃取物可以抑制肝癌HepG-2細(xì)胞的增殖，隨著時(shí)間的延長和藥物濃度的增加，其抑制作用越明顯，當(dāng)藥物濃度為200μmol/L作用時(shí)間為48 h時(shí)，對(duì)HepG-2細(xì)胞的抑制率為52.3％，接近半數(shù)

3、抑制濃度（IC50）。HE染色結(jié)果顯示：云芝氯仿萃取物處理的肝癌HepG-2細(xì)胞，與對(duì)照組相比細(xì)胞間距增大，細(xì)胞變小、失去原有形態(tài)、細(xì)胞核皺縮、染色變深、細(xì)胞碎裂、可見凋亡小體，并且隨著時(shí)間和劑量的增加凋亡程度越嚴(yán)重。DNA ladder方法檢測結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比較，云芝氯仿萃取物低、中、高劑量組作用48h時(shí)HepG-2細(xì)胞DNA降解成DNA片段，并隨著劑量增加，降解作用越明顯。Western方法檢測云芝氯仿萃取物作用HepG-2細(xì)