樺癌褐孔菌多糖誘導(dǎo)人肝癌HepG-2細(xì)胞凋亡研究.pdf

1、本文研究了樺癌褐孔菌多糖(FOPS)作用于體外培養(yǎng)的人肝癌HepG-2細(xì)胞株，觀察其抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。采用噻唑藍(lán)比色法（MTT法）測定了FOPS對人肝癌HepG-2腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用;通過倒置顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳觀察凋亡細(xì)胞的DNA片段;流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期的改變及細(xì)胞凋亡率;RT-PCR法檢測藥物處理前后凋亡相關(guān)基因Bcl-2及BaxmRNA表達(dá)的變化。
　　發(fā)

2、現(xiàn)FOPS在體外對人肝癌HepG-2細(xì)胞的生長有明顯的抑制作用。MTT檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)FOPS對人肝癌HepG-2細(xì)胞株的增殖抑制作用呈劑量、時間依賴關(guān)系。通過倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)實驗組細(xì)胞生長稀疏，胞漿透亮度下降，細(xì)胞脫落增多;透射電鏡下觀察，實驗組細(xì)胞核染色質(zhì)固縮、邊集，核質(zhì)內(nèi)可見空泡，出現(xiàn)凋亡小體等。通過瓊脂糖凝膠電泳觀察到呈梯度的DNA片斷。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果，實驗組均可見亞二倍體峰，且凋亡率隨用藥濃度的增加而增大，S期細(xì)胞所占百分比

3、也隨用藥濃度的增加而上升，表明腫瘤細(xì)胞在S期聚集，阻止了向G2/M期的轉(zhuǎn)換，從而影響了細(xì)胞周期。凋亡基因檢測結(jié)果，用藥組細(xì)胞中Bax mRNA的表達(dá)明顯增強(qiáng)，而Bcl-2 mRNA的表達(dá)卻無明顯變化。
　　結(jié)果表明:FOPS在體外可抑制HepG-2細(xì)胞的增殖，并可誘導(dǎo)HepG-2細(xì)胞發(fā)生凋亡，出現(xiàn)凋亡所特有的形態(tài)學(xué)及生化變化。FOPS誘導(dǎo)HepG-2細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能與增強(qiáng)Bax的表達(dá)有關(guān)。提示FOPS的抗腫瘤作用可能與誘導(dǎo)細(xì)胞凋