鹽酸洛拉曲克在體外促進人肝癌細胞HepG-2凋亡的實驗研究.pdf

1、目的：研究鹽酸洛拉曲克對體外培養(yǎng)人肝癌細胞HepG-2的增殖抑制作用和對肝癌細胞HepG-2凋亡抑制基因Bcl-2表達的影響。 方法：MTT比色法觀察鹽酸洛拉曲克對人肝癌細胞株HepG-2增殖的抑制作用；用免疫細胞化學染色法檢測其對人肝癌細胞HepG-2凋亡抑制基因Bcl-2的表達影響。 結(jié)果： 1、實驗前HepG-2細胞為貼壁的梭形細胞，細胞排列緊密，生長增殖速度快，每2～3天需傳一代；在加入化療藥物鹽酸洛拉曲

2、克12h后鏡下觀察細胞形態(tài)變?yōu)閳A形，體積變小，細胞密度增加和細胞固縮，細胞膜和核膜完整，線粒體發(fā)生超濃縮和染色質(zhì)進行性固縮，并向核周“崩潰”形成一個或多個塊狀結(jié)構(gòu)、“致密球體”或向外“發(fā)芽”形成葡萄串樣小球體。24后觀察鏡下視野模糊，細胞膜損傷、腫脹、裂解。 2、腫瘤細胞體外藥物敏感性檢測即MTT法，試驗設(shè)立三組藥物即（ADM組、DDP組、鹽酸洛拉曲克組）每組藥物設(shè)立四個濃度梯度，同時設(shè)立空白對照組，結(jié)果顯示，鹽酸洛拉曲克對人肝

3、癌細胞HepG-2的生長具有顯著的抑制作用．促進腫瘤細胞的凋亡，高濃度組的生長抑制率可達80．15%，具有良好的量效關(guān)系，其中高濃度給藥組的抑瘤率最高，其次是中濃度組，對每個瘤株均重復(fù)實驗3次，實驗結(jié)果的重復(fù)性比較好。當各組藥物濃度達到最大時鹽酸洛拉曲克組與陽性對照組（ADM組和DDP組）比較其腫瘤細胞的抑制率分為80．15%、48．12%、51．69%，差異有統(tǒng)計學意義（P=0．013，X2檢驗）。 3、免疫細胞化學染色結(jié)果顯

4、示，對不同濃度鹽酸洛拉曲克作用的肝癌HepG-2細胞Bcl-2的表達進行檢測，未用藥物干預(yù)組（對照組）陽性細胞呈棕黃色，染色較深，顆粒分布密集，低濃度組（2μg/ml）與對照組相比未見明顯區(qū)別，中濃度組（20μg/ml）與高濃度組（200μg/ml）較對照組陽性細胞呈淡染，其中高濃度組尤為明顯，顆粒分布疏松。隨著鹽酸洛拉曲克濃度的遞增，凋亡指數(shù)逐漸增加，即腫瘤細胞迅速減少，而Bcl-2陽性細胞表達率逐漸下降。當藥物濃度達到最大時（200