肥胖小鼠下丘腦SH2B1、SOCS3及PTP1B mRNA表達的動態(tài)變化.pdf

1、目的:檢測不同周齡肥胖及正常小鼠下丘腦組織SH2B1、SOCS3和PTP1B mRNA的表達以及血漿瘦素水平,比較肥胖小鼠及正常小鼠上述指標(biāo)的差異；探討肥胖小鼠及正常小鼠不同周齡下丘腦組織SH2B1、SOCS3和PTP1B表達的變化規(guī)律及其與瘦素的關(guān)系,為研究肥胖的發(fā)病機制提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法:選用健康C57/b16乳鼠60只(周齡6周,雌雄各半),隨機分為對照組(24只)和試驗組(36只)。對照組喂養(yǎng)普通飼料,實驗組喂養(yǎng)

2、高脂飼料。喂養(yǎng)至12周時,隨機選擇對照組12只,實驗組18只,稱體重(Wt)后按照“體重＞對照組體重均數(shù)+2倍標(biāo)準(zhǔn)差”篩選出肥胖小鼠11只,測量體長,眼球取血并取下丘腦組織。剩余小鼠喂養(yǎng)至24周時對照組12只及實驗組篩選的肥胖小鼠13只,測量體長,眼球取血并取下丘腦組織和腸系膜周圍脂肪組織。小鼠全血離心后取上層血清,葡萄糖氧化酶法檢測其空腹血糖(FPG),全自動生化分析儀檢測甘油三脂(TG),酶聯(lián)免疫法(ELISA)法分別檢胰島素(fa

3、sting insulin),瘦素(leptin)指標(biāo),計算Lee's指數(shù)[體重(g)1/3×1000/8長(cm)]及穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR=血糖×胰島素/22.5)。TRIZOL法提取小鼠下丘腦的mRNA,RT-PCR檢測SH2B1,SOCS3及PTP1B表達；熒光定量PCR法檢測下丘腦SH2B1,SOCS3及PTP1B含量,脂肪組織HE染色觀察脂肪細胞大小。
　　 結(jié)果:①與同周齡對照組小鼠相比,12周及2

4、4周肥胖組小鼠Wt、Lee’s指數(shù)、FPG、TG、LEP、FINS及HOMA-IR均升高。②在肥胖組小鼠中,24周齡較12周齡小鼠血清胰島素、瘦素及HOMA-IR增加。對照組小鼠中24周瘦素水平高于12周,但胰島素及HOMA-IR無差異。⑧相同放大倍數(shù)視野下,肥胖組小鼠脂肪細胞數(shù)目肥胖組較正常組減少,脂肪細胞面積增大；正常組及肥胖組24周脂肪細胞數(shù)目均較12周減少,脂肪面積增大。④與同周齡對照組小鼠相比,12及24周齡肥胖組小鼠下丘腦組

5、織SH2B1mRNA表達減少；而SOCS3及PTP1B mRNA表達增加。⑤在肥胖組小鼠中,24周齡小鼠下丘腦組織SH281mRNA表達低于12周齡,而SOCS3及PTP1BmRNA表達高于12周齡。⑥在對照組小鼠中,24周齡小鼠下丘腦組織SOCS3及PTP1B mRNA表達高于12周齡組,而SH2B1 mRNA表達無差異。⑦直線相關(guān)分析顯示,肥胖小鼠LEP與下丘腦組織SH2B1mRNA表達成負相關(guān),與SOCS3及PTP1BmRNA表達