PCR-DGGE法分析分娩方式對新生兒早期腸道菌群的影響.pdf

1、目的：生命早期的腸道菌群的定植對嬰兒的健康發(fā)展起著重大作用。本研究采用聚合酶鏈反應(yīng)-變性梯度凝膠電泳法(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis，PCR-DGGE)探討不同分娩方式對新生兒早期腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響。
　　方法：以32例同期出生的正常足月兒為研究對象，按分娩方式分為自然分娩組和剖宮產(chǎn)組(n=16)，分別于生后第1天(>12h)、3

2、天及5天采集糞便樣本，抽提樣本中細(xì)菌基因組總DNA，并對其16S rDNA V3可變區(qū)進行PCR擴增和DGGE測定，獲得腸道菌群分子指紋圖譜，進行多樣性和相似性等特征分析。
　　結(jié)果：(1)生命早期腸道菌群定植具有個體特異性，并呈動態(tài)變化。(2)多樣性分析顯示：新生兒生后第1天腸道菌群定植較少；生后第3天兩組間多樣性無明顯差異；第5天多樣性指數(shù)H’在剖宮產(chǎn)組和自然分娩組分別為1.474±0.560、1.920±0.290，優(yōu)勢度指

3、數(shù)D分別為0.699±0.172、0.821±0.056，兩組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，剖宮產(chǎn)組H’、D均低于自然分娩組。(3)成對相似性分析：生后第3天，成對相似性系數(shù)Cs在剖宮產(chǎn)組及自然分娩組內(nèi)Cs分別為0.584(0.395-0.631)、0.214(0.091-0.364)；剖宮產(chǎn)組內(nèi)Cs值<0.30的占該組總Cs值個數(shù)的21.4％，而自然分娩組內(nèi)Cs<0.30的占該組76.0％，兩組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)