豫藉漢人AIH-I型和AIH-I型-PBC重疊綜合征在HLA-DRB1和DQA1基因的遺傳易感性.pdf

1、背景與目的
　　 自身免疫性肝病(autoimmune liver disease，AILD)是西方國家較常見的一種非病毒性肝病，也是進(jìn)行原位肝移植的主要肝病之一。隨著現(xiàn)代免疫、生化等實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)的不斷進(jìn)步和提高，我國人群中AILD的檢出率近年來有所增高，并得到國內(nèi)消化疾病研究者的重視和關(guān)注。
　　 AILD是一組免疫介導(dǎo)的、以肝臟為靶器官的自身免疫病，包括以肝細(xì)胞實(shí)質(zhì)損害為主、血清肝細(xì)胞炎癥指標(biāo)明顯升高的自身免疫性肝炎

2、(autoimmunehepatitis，AIH)，以膽管病變?yōu)橹?、淤膽指?biāo)升高顯著的原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)和原發(fā)性硬化性膽管炎(primary sclerosingcholangitis，PSC)，以及這三種疾病中任兩者之間的重疊綜合征(overlapsyndrome)。以上各種類型疾病均可表現(xiàn)為嚴(yán)重的肝臟病變，最終進(jìn)展至肝硬化。由于其病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，目前尚無治愈性

3、藥物。國內(nèi)外大量研究表明AILD主要與遺傳易感性和分子模擬機(jī)制有關(guān)。
　　 人類白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)系統(tǒng)即人類的主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex，MHC)，基因定位在人類第6號(hào)染色體短臂6p21.31，長約3600kb，占人基因組的1/3000，其結(jié)構(gòu)顯示高度的異質(zhì)性，即具有多基因性和多態(tài)性。HLA作為AILD的遺傳背景已達(dá)成共

4、識(shí)。國內(nèi)外有關(guān)AILD遺傳易感性研究的資料較少，不同種族、不同地區(qū)的研究結(jié)果也不盡相同，亟待積累大量資料揭示該病的遺傳學(xué)特點(diǎn)。
　　 本研究選擇豫籍漢人AIH-I型和AIH-I型-PBC重疊綜合征患者，與健康人群做病例對(duì)照研究，探討其在HLA-DRB1和DQA1基因座位上可能存在的易感基因及其單倍型，豐富中國人AIH-I型和AIH-I型-PBC重疊綜合征的遺傳學(xué)特點(diǎn)，為其發(fā)病機(jī)制的研究及其診斷和治療提供理論基礎(chǔ)。材料與方法

5、>　　 應(yīng)用序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction-sequencespecific primers，PCR-SSP)技術(shù)對(duì)58例AIH-I型和61例AIH-I型-PBC重疊綜合征患者及50例正常人對(duì)照組的HLA-DRB1和DQA1等位基因進(jìn)行低倍分型。采用SHEsis在線分析，對(duì)每組每個(gè)基因位點(diǎn)進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)，并求出基因頻數(shù)及頻率，每兩組進(jìn)行單倍型比較?；蝾l數(shù)比較行

6、x2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。絕對(duì)連鎖不平衡(absolute linkage disequilibrium，ALD)參數(shù)：△ij=HF-PiPj[HF(haplotype frequency)為單倍型觀察頻率，Pi和Pj分別為兩位點(diǎn)某等位基因頻率]，最大連鎖不平衡(maximal linkage disequilibrium，MLD)參數(shù)：△ij(最大)=Pi(1-Pj)(△ij≥0且Pi＜Pj)，相對(duì)連鎖不平衡(relative

7、linkagedisequilibrium，RLD)參數(shù)：△ij(相對(duì)值)=△ij/△ij(最大)。結(jié)果
　　 各組各個(gè)基因座位均符合Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)，基因頻率的分布存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01或＜0.05)。與正常對(duì)照組比較，AIH-I型組DQA1*01、DRB1*07-DQA1*01和DRB1*07-DQA1*03均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05或＜0.01)； AIH-I型-PBC組DRB1*08、DRB

8、1*12、DRB1*08-DQA1*01和DRB1*12-DQA1*01均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。AIH-I型-PBC組與AIH-I型組比較，DRB1*08、DRB1*14、DRB1*12、DQA1*06、DRB1*08-DQA1*01、DRB1*14-DQA1*01、DRB1*07-DQA1*01和DRB1*10-DQA1*05均存在顯著性差異(P＜0.0167)。結(jié)論
　　 1 AIH-I型和AIH-I型-PBC重疊

9、綜合征均與HLA相關(guān)。HLA-DRB1和DQA1基因及其組成的單倍型在AIH-I型和AIH-I型-PBC重疊綜合征中表現(xiàn)各異，有各自獨(dú)立的分布特征。
　　 2在豫籍漢人中，DQA1*01可能是AIH-I型的抵抗基因；DRB1*08可能是AIH-I型-PBC重疊綜合征的易感基因，而DRB1*12可能是其抵抗基因。DRB1*07-DQA1*01單倍型可能是AIH-I型患者的較強(qiáng)危險(xiǎn)因素，DRB1*08-DQA1*01單倍型可能是AI