mPTP在七氟烷后處理誘導(dǎo)腦保護(hù)中的作用研究.pdf

1、腦缺血損傷是圍術(shù)期常見(jiàn)并發(fā)癥，尋找其保護(hù)措施是目前研究熱點(diǎn)之一。我們實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)“缺血預(yù)處理”及多種“非缺血預(yù)處理”（如：吸入麻醉藥、電針和高壓氧）均能明顯減輕腦缺血損傷。2003年zhao等發(fā)現(xiàn)心肌缺血后，在長(zhǎng)時(shí)間的再灌注之前進(jìn)行數(shù)次短暫再灌注/缺血的循環(huán)，可明顯減輕心肌缺血再灌注損傷的現(xiàn)象，由此提出“缺血后處理”（Ischemic Postconditioning,IPost）概念。最近，我們研究發(fā)現(xiàn)在腦和脊髓缺血再灌注損傷中同樣

2、存在“缺血后處理”現(xiàn)象。與預(yù)處理相比，“缺血后處理”具有明顯的優(yōu)勢(shì)，可行性強(qiáng)，臨床應(yīng)用前景廣闊。但“缺血后處理”仍然具有一定的局限性，因此尋找可模擬“缺血后處理”的“非缺血后處理”手段具有重要意義。七氟烷是一種新型吸入麻醉藥，具有明顯的優(yōu)勢(shì)，臨床使用廣泛。目前關(guān)于“七氟烷后處理”能否模擬腦“缺血后處理”的保護(hù)效果未見(jiàn)報(bào)道，因此研究“七氟烷后處理”是否具有腦保護(hù)作用意義重大。
　　本研究利用大鼠中動(dòng)脈阻閉模型（Middle Cere

3、bral Artery Occlusion,MCAO），首先研究七氟烷后處理是否有腦保護(hù)作用，進(jìn)而探討mPTP在七氟烷后處理腦保護(hù)中的作用。本研究由二部分組成：第一部分為七氟烷后處理腦保護(hù)作用及其劑量效應(yīng)關(guān)系的研究；第二部分為mPTP在七氟烷后處理腦保護(hù)機(jī)制中的作用研究。
　　第一部分，七氟烷后處理對(duì)腦保護(hù)作用的研究
　　目的：評(píng)價(jià)在缺血后期及再灌注早期吸入不同濃度的七氟烷行后處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其劑

4、量依賴性。
　　方法：雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、吸氧組和0.5MAC、1.0MAC、1.5MAC七氟烷后處理組，每組10只。采用MCAO模型120min后再灌注72h制備局灶性腦缺血模型。各七氟烷后處理組于再灌注即刻的前20min和后10min給予不同濃度七氟烷吸入。再灌注后的24h、48h和72h行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分并于最后一次評(píng)分后測(cè)定腦梗死容積比。
　　結(jié)果：0.5MAC、1.0MAC和1.5MAC組的腦梗死

5、容積比分別為0.39±0.03，0.31±0.03和0.24±0.03(各組之間P<0.05)，明顯小于對(duì)照組0.53±0.05(P<0.05)。吸氧組為0.51±0.05，與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。各個(gè)時(shí)間點(diǎn)七氟烷后處理組神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分明顯優(yōu)于對(duì)照組和吸氧組。
　　結(jié)論：在局灶性腦缺血再灌注的缺血后期和再灌注早期吸入0.5MAC、1.0MAC和1.5MAC七氟烷行后處理均具有腦保護(hù)作用，且呈劑量依賴性。
　　第

6、二部分，mPTP在七氟烷后處理誘導(dǎo)腦保護(hù)中的作用研究
　　PartI:mPTP開(kāi)放劑Atr對(duì)七氟烷后處理腦保護(hù)作用的影響
　　目的：觀察蒼術(shù)苷(Atr)對(duì)七氟烷后處理誘導(dǎo)的腦保護(hù)作用的影響。
　　方法：清潔級(jí)雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為對(duì)照組，1.0MACSevo組，1.0MACSevo+Atr組，1.0MACSevo+vehicle組和單純Atr組。每組10只。Sevo后處理于再灌注即刻的前20min和后10min給

7、予Sevo吸入。Atr于Sevo后處理前即刻通過(guò)側(cè)腦室注射。再灌注后的24h、48h和72h行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分并于最后一次評(píng)分后測(cè)定腦梗死容積比。
　　結(jié)果：缺血再灌注72h后腦梗死容積百分比Sevo組0.32±0.05明顯小于空白對(duì)照組0.55±0.07(P=0.000)；Sevo+Atr組0.57±0.06和空白對(duì)照組(P=0.418)、Atr組0.56±0.05(P=0.605)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而和Sevo組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(

8、P=0.000)；Atr組和空白對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.768)；Sevo+vehicle組(0.35±0.06，P=0.218)和Sevo組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分Sevo組和Sevo+vehicle組明顯優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)。Sevo+Atr組以及單純Atr組明顯低于Sevo后處理組(P<0.05)。
　　結(jié)論：mPTP開(kāi)放劑可取消七氟烷后處理的腦保護(hù)作用。
　　PartII:mPTP關(guān)閉劑

9、CsA對(duì)七氟烷后處理腦保護(hù)作用的影響
　　目的：觀察環(huán)孢菌素A(CsA)對(duì)七氟烷后處理誘導(dǎo)的腦保護(hù)作用的影響。
　　方法：清潔級(jí)雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為對(duì)照組，1.0MACSevo組，1.0MACSevo+CsA組，1.0MACSevo+vehicle組和單純CsA組。每組10只。Sevo后處理于再灌注即刻的前20min和后10min給予Sevo吸入。CsA于Sevo后處理前即刻通過(guò)側(cè)腦室注射。再灌注后的24h、48h和

10、72h行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分并于最后一次評(píng)分后測(cè)定腦梗死容積比。
　　結(jié)果：缺血再灌注72h后腦梗死容積百分比Sevo組(0.31±0.04)、Sevo+CsA組(0.25±0.04)、CsA組(0.30±0.03)和Sevo+vehicle組(0.33±0.05)均明顯小于空白對(duì)照組(0.55±0.05)(P=0.000)；Sevo+CsA組(0.25±0.04)明顯小于Sevo組和CsA組。Sevo組、Sevo+vehicle組、S

11、evo+CsA組和單純CsA組在各時(shí)間點(diǎn)明顯優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)。Sevo+CsA組在各時(shí)間點(diǎn)明顯優(yōu)于Sevo后處理組(P<0.05)。
　　結(jié)論：mPTP關(guān)閉劑具有腦保護(hù)作用，并協(xié)同增強(qiáng)七氟烷后處理的腦保護(hù)作用。
　　結(jié)論：1、七氟烷后處理對(duì)腦缺血/再灌注損傷具有保護(hù)作用，并且在0.5MAC到1.5MAC之間其保護(hù)作用呈劑量依賴性增強(qiáng)。2、mPTP參與七氟烷后處理腦保護(hù)作用的機(jī)制。mPTP開(kāi)放劑Atr可取消七氟烷后處