聯(lián)合應(yīng)用肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機制的實驗研究.pdf

1、背景：
　　 缺血再灌注損傷(ischemiareperfusioninjury)的概念是在1960年由等Jennings首次提出，此后該問題成為了困擾醫(yī)學(xué)工作者的一個難題。為了減輕心肌缺血再灌注損傷并最終縮小心肌梗死面積，在臨床上和實驗研究中均采取了多種干預(yù)措施。其中缺血預(yù)處理(ischemiapreconditioning)強大的心肌保護(hù)作用已得到公認(rèn)，但臨床缺血事件的不可預(yù)測性使其更多地是停留在了理論層面。除了短暫缺血之外

2、，多種刺激均可誘發(fā)缺血預(yù)處理樣保護(hù)作用。吸入麻醉藥七氟烷后處理的心肌保護(hù)作用已經(jīng)在動物和人體研究中得到了證實，七氟烷后處理的主要優(yōu)點是操作簡單和實施容易，并且能夠與其他多種心肌保護(hù)干預(yù)措施聯(lián)合應(yīng)用，對于減輕心肌缺血再灌注損傷是一種極具臨床應(yīng)用前景的干預(yù)措施。肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理(limbremoteischemicpostconditioning)是通過在上肢或下肢等部位實施遠(yuǎn)隔缺血刺激，以保護(hù)心肌對抗缺血再灌注損傷。肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理的

3、主要優(yōu)點是實施簡單、無需有創(chuàng)操作和不需要額外的費用，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。
　　 低氧誘導(dǎo)因子1（hypoxia-induciblefactor1,HIF-1）能夠在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)多種基因的表達(dá)，在細(xì)胞和組織缺血適應(yīng)過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。其下游基因血紅素氧化酶1(Hemeoxygenase1，HO-1)和誘生型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)具有保護(hù)心肌對抗缺血再灌注損傷的

4、作用。絲氨酸／蘇氨酸激酶Akt和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellularregulatedproteinkinases，ERK1/2)是再灌注損傷救援激酶途徑（reperfusioninjurysalvagekinasepathway，RISK途徑）的重要組成成分，是各種不同干預(yù)措施發(fā)揮心肌保護(hù)作用的交匯點。在缺血再灌注過程中，RISK途徑激活能夠?qū)π募p傷產(chǎn)生強大的保護(hù)作用。
　　 本實驗從臨床應(yīng)用出發(fā)，擬觀察聯(lián)合應(yīng)用兩

5、種極具應(yīng)用前景的干預(yù)措施—七氟烷后處理和肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理能否獲得有益的協(xié)同性心肌保護(hù)作用。同時對缺血缺氧過程中關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子HIF-1的表達(dá)情況以及RISK途徑的激活情況進(jìn)行觀察，以初步探討這兩種干預(yù)措施發(fā)揮作用的機制。全部實驗共分三個部分：
　　 第一部分：聯(lián)合應(yīng)用肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理組處理對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用
　　 采用8周齡、體重250～320g的健康SpragueDawley(SD)大鼠建立

6、在體心肌缺血再灌注損傷模型，共分六個實驗組（每組10只大鼠）：空白對照組（CON組）、缺血再灌注損傷組（IR組）、缺血預(yù)處理組（IPC組）、肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理組(LRIPOC組)、七氟烷后處理組（SEVPOC組）以及聯(lián)合應(yīng)用肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理組（COMBINE組）。所有大鼠開胸后采用5-0絲線將冠狀動脈左前降支(leftanteriordescendingcoronaryartery，LAD)套扎做成活結(jié)。除CON組之外，

7、所有大鼠均接受阻斷LAD局部心肌缺血30min和開放LAD心肌血流再灌注120min的處理。IR組不采取任何其他措施；IPC組結(jié)扎LAD前進(jìn)行3個循環(huán)（每個循環(huán)為5min缺血-5min再灌注）的缺血預(yù)處理，總處理時間為30min;LRIPOC組在心肌缺血15min時采用止血帶結(jié)扎大鼠雙側(cè)后肢造成缺血10min，并在再灌注前5min開放后肢血流灌注；SEVPOC組在開放LAD實施再灌注前5min經(jīng)小動物麻醉機的揮發(fā)罐吸入1MAC的七氟烷，

8、直至再灌注后5min;COMBINE組在心肌缺血15min時采用止血帶結(jié)扎大鼠雙側(cè)后肢造成肢體缺血10min，再灌注前5min開放后肢血流灌注，并吸入1MAC的七氟烷，直至再灌注后5min。實驗過程中維持大鼠直腸體溫在37～38℃范圍內(nèi)，連續(xù)監(jiān)測心率(heartrate，HR)、收縮壓(systolicbloodpressure，SBP)、舒張壓(diastolicbloodpressure，DBP)、平均動脈壓(meanarteria

9、lpressure，MAP)和Ⅱ?qū)?lián)ECG，并計算HR和SBP的乘積(rate-pressureproduct，RPP)作為心肌氧耗指數(shù)。記錄實驗中心律失常情況并進(jìn)行評分。在再灌注120min時抽取動脈血標(biāo)本，采用ELISA試劑盒檢測大鼠血清乳酸脫氫酶(lacticdehydrogenase，LDH)、肌酸激酶心肌型同工酶(creatinekinaseMBisoenzyme，CK-MB)和心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cardiacTroponin-

10、Ⅰ，cTnⅠ)，并采用伊文思藍(lán)和氯化三苯基四氮唑(TTC)雙重染色測定梗死面積(infarctsize，IS％)。
　　 排除實驗中不合格的大鼠，最終共有49只大鼠納入實驗，其中CON組9只，IR組、LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組個IPC組各8只。各組大鼠的一般情況、缺血面積占左心室比值各組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組和COMBINE組再灌注初期發(fā)生心律

11、失常的動物數(shù)有所減少和心律失常的持續(xù)時間有不同程度的縮短，但是差異無統(tǒng)計學(xué)意義。與IPC組相比，IR組、LRIPOC組、SEVPOC組和COMBINE組再灌注初期發(fā)生心律失常的動物數(shù)顯著增多，心律失常持續(xù)時間和心律失常評分明顯升高。
　　 血清LDH濃度的總體組間比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(F=51.503，P＜0.01)。與CON組相比，IR組、LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組血清LDH濃度明顯升高；與

12、IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組血清LDH濃度明顯降低；與IPC組相比，COMBINE組血清LDH濃度無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，但LRIPOC組和SEVPOC組血清LDH濃度明顯升高；LRIPOC組和SEVPOC組血清LDH濃度比較差異無顯著統(tǒng)計學(xué)意義；與COMBINE組相比，LRIPOC組和SEVPOC組血清LDH濃度明顯升高。
　　 血清CK-MB濃度的總體組間比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（F=32

13、.244，P＜0.01）。與CON組相比，血清CK-MB濃度在IPC組和COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在IR組、LRIPOC組和SEVPOC組明顯升高；與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組血清CK-MB濃度明顯降低；與IPC組相比，LRIPOC組和SEVPOC組血清CK-MB濃度的明顯升高；與COMBINE組相比，LRIPOC組和SEVPOC組血清CK-MB濃度無顯著統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 血

14、清cTnI濃度的總體組間比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(F=81.511，P＜0.01)。與CON組相比，IR組、LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組血清cTnI濃度明顯升高；與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組血清cTnI濃度明顯降低；與IPC組相比，血清cTnI濃度在COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在LRIPOC組和SEVPOC組明顯升高；LRIPOC組和SEVPOC組血清cTn

15、I濃度比較差異無顯著統(tǒng)計學(xué)意義；與COMBINE組相比，LRIPOC組和SEVPOC組血清cTnI濃度明顯升高。
　　 各組的心肌梗死面積（IS%值）為：CON組，（3.7±3.4）%；IR組,（64.2±13.6））%;LRIPOC組，(45.8±15.6)%;SEVPOC組，(43.6±9.7)%;COMBINE組，(30.9±11.3)%；IPC組，（22.0±5.0）%。IS%值的總體組間比較差異具有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(F=

16、33.333，P＜0.01)。心肌梗死面積兩組之間的比較結(jié)果如下：與CON組相比，IR組、LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組心肌梗死面積明顯增大；與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組心肌梗死面積明顯縮小；與IPC組相比，心肌梗死面積在COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在LRIPOC組和SEVPOC組明顯增大；與COMBINE組相比，LRIPOC組和SEVPOC組心肌梗死面積明顯

17、增大。
　　 第二部分：HIF-1在聯(lián)合應(yīng)用遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理心肌保護(hù)作用中的地位
　　 采用8周齡、體重250～320g的健康SD大鼠建立在體心肌缺血再灌注損傷模型，即結(jié)扎大鼠LAD實施局部心肌缺血30min后開放LAD實施心肌血流再灌注60min。共分五個實驗組（每組5只大鼠）：缺血再灌注損傷組（IR組）、缺血預(yù)處理組（IPC組）、肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理組（LRIPOC組）、七氟烷后處理組(SEVPOC組)以及

18、聯(lián)合應(yīng)用肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理組（COMBINE組）。實驗過程中維持大鼠直腸溫度在37～38℃范圍內(nèi)。再灌注末，再次結(jié)扎大鼠LAD，并迅速摘取大鼠心臟。留取結(jié)扎線以下顏色灰白的左心室組織作為缺血區(qū)心肌組織，留取右心室作為非缺血區(qū)心肌組織；同時留取大鼠后肢肌肉（觸發(fā)遠(yuǎn)隔缺血后處理的組織）和前肢肌肉（非觸發(fā)組織）。采用實時定量PCR技術(shù)檢測（2-ΔΔct法）組織內(nèi)HIF-1α、HO-1和iNOS基因的表達(dá)。
　　 非缺血心

19、肌組織目的基因的表達(dá)情況如下：
　　 非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA表達(dá)量的均值是按照IR組、LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組的順序遞增。與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA表達(dá)量明顯增高；與IPC組相比，LRIPOC組、SEVPOC組和COMBINE組非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA表達(dá)量明顯降低；與LRIPOC組

20、相比，非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA表達(dá)量在SEVOPOC組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在COMBINE組明顯增高。與SEVPOC組相比，COMBINE組非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA的表達(dá)量明顯增高。
　　 非缺血心肌組織內(nèi)HO-1mRNA表達(dá)量的均值是按照IR組、LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組的順序遞增。與IR組相比，非缺血心肌組織內(nèi)HO-1mRNA表達(dá)量在LRIPOC組和SEVPOC組無顯

21、著統(tǒng)計學(xué)差異，在COMBINE組和IPC組明顯增高；與IPC組相比，非缺血心肌組織內(nèi)HO-1mRNA表達(dá)量在COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在LRIPOC組和SEVPOC組明顯降低。與LRIPOC組相比，SEVPOC組和COMBINE組非缺血心肌組織內(nèi)HO-1mRNA表達(dá)量明顯增高；與SEVPOC組相比，COMBINE組非缺血心肌組織內(nèi)HO-1mRNA表達(dá)量明顯增高。
　　 非缺血心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量的均值是按照I

22、R組、LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組的順序遞增。與IR組相比，非缺血心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量在LRIPOC組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在SEVPOC組、COMBINE組和IPC組明顯增高；與IPC組相比，非缺血心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量在COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在LRIPOC組和SEVPOC組明顯降低；與LRIPOC組相比，非缺血心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量在SEVPOC組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異

23、，在COMBINE組明顯增高；與SEVPOC組相比，COMBINE組非缺血心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量無顯著統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 缺血心肌組織目的基因的表達(dá)情況如下：
　　 缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA表達(dá)量的均值是按照IR組、LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組的順序遞增。與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA表達(dá)量明

24、顯增高；與IPC組相比，LRIPOC組、SEVPOC組和COMBINE組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA表達(dá)量明顯降低；LRIPOC組、SEVPOC組和COMBINE組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HIF-1αmRNA表達(dá)量比較差異無顯著統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HO-1mRNA的表達(dá)量的均值是按照IR組、IPC組、SEVPOC組、COMBINE組和LRIPOC組的順序遞增。與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMB

25、INE組和IPC組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HO-1mRNA表達(dá)量明顯增高；LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)HO-1mRNA表達(dá)量比較差異無顯著統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 缺血區(qū)心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量的均值是按照IR組、SEVPOC組、IPC組、COMBINE組和LRIPOC組的順序遞增。與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBNE組和IPC組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量

26、明顯增高；與IPC組相比，缺血區(qū)心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量在SEVPOC組和COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在LRIPOC組明顯增高；與LRIPOC組相比，SEVPOC組和COMBINE組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)iNOSmRNA表達(dá)量明顯降低。
　　 第三部分PI3K/Akt和ERK1/2信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在聯(lián)合應(yīng)用遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理心肌保護(hù)作用中的地位
　　 采用8周齡、體重250～320g的健康SD大鼠建立在體心

27、肌缺血再灌注損傷模型，即結(jié)扎大鼠LAD實施心肌缺血30min，然后開放LAD實施心肌血流再灌注60min。共分五個實驗組（每組5只大鼠）：缺血再灌注損傷組（IR組）、缺血預(yù)處理組(IPC組)、肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理組(LRIPOC組)、七氟烷后處理組(SEVPOC組)以及聯(lián)合應(yīng)用肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理組（COMBINE組）。實驗過程中維持大鼠直腸溫度在37～38℃。再灌注期末，再次結(jié)扎LAD，并迅速摘取心臟。留取結(jié)扎線以下顏色灰白

28、的左心室組織作為缺血區(qū)心肌組織，留取右心室作為非缺血區(qū)心肌組織。采用Western-Blot技術(shù)檢測大鼠心肌組織內(nèi)Akt、磷酸化p-Akt、ERK1/2和磷酸化p-ERK1/2的表達(dá)情況，并計算p-Akt與Akt的比值以及p-ERK1/2與ERK1/2的比值。
　　 結(jié)果顯示：缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值的各組間比較是IR組的數(shù)值最小，并按照LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組的順序遞增。缺血區(qū)心

29、肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值的組間比較結(jié)果如下：與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值明顯升高；與IPC組相比，LRIPOC組、SEVPOC組和COMBINE組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值明顯降低；與LRIPOC組相比，缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值在SEVPOC組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在COMBINE組明顯升高；與SEVPOC組相比，COMBINE

30、組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值明顯升高。
　　 非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值與缺血區(qū)心肌組織相似，同樣也是IR組的數(shù)值最小，并按照LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組的順序遞增。非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值的組間比較結(jié)果如下：與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值明顯升高；與IPC組相比，非缺血區(qū)心肌

31、組織內(nèi)p-Akt/Akt比值在LRIPOC組和SEVPOC組明顯降低，在COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異;與LRIPOC組相比，非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值在SEVPOC組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在COMBINE組明顯升高；與SEVPOC組相比，COMBINE組非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-Akt/Akt比值明顯升高。
　　 缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值的各組間比較是IR組的數(shù)值最小，并按照LRIPOC組、SEVPOC組

32、、COMBINE組和IPC組的順序遞增。缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值的組間比較結(jié)果如下：與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值明顯升高；與IPC組相比，缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值在LRIPOC組和SEVPOC組明顯降低，在COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異；與LRIPOC組相比，缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值在SEVPOC組無顯著統(tǒng)計學(xué)差

33、異，在COMBINE組明顯升高；與SEVPOC組相比，COMBINE組缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值明顯升高。
　　 非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值與缺血區(qū)心肌組織相似，同樣也是IR組的數(shù)值最小，并按照LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組的順序遞增。非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值的組間比較結(jié)果如下：與IR組相比，LRIPOC組、SEVPOC組、COMBINE組和IPC組非缺血區(qū)心

34、肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值明顯升高；與IPC組相比，非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值在LRIPOC組和SEVPOC組明顯降低，在COMBINE組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異；與LRIPOC組相比，非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值在SEVPOC組無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在COMBINE組明顯升高；與SEVPOC組相比，COMBINE組非缺血區(qū)心肌組織內(nèi)p-ERK/ERK比值明顯升高。
　　 結(jié)論：
　　 通過本實驗，我們

35、得出以下結(jié)論：
　　 1．在大鼠在體心肌缺血再灌注損傷模型，肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理均能有效減輕心肌缺血再灌注損傷；聯(lián)合應(yīng)用兩種干預(yù)措施能夠進(jìn)一步減輕心肌缺血再灌注損傷。
　　 2．肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理均能誘發(fā)系統(tǒng)性保護(hù)作用，即兩種干預(yù)措施均能誘發(fā)缺血區(qū)心肌、非缺血區(qū)心肌、缺血區(qū)下肢肌肉內(nèi)HIF-1α、HO-1和iNOS基因表達(dá)加強；聯(lián)合應(yīng)用兩種干預(yù)措施能夠進(jìn)一步增強上述基因的表達(dá)。
　　 3

36、．肢體遠(yuǎn)隔缺血后處理和七氟烷后處理均能誘導(dǎo)Akt和ERK1/2磷酸化，提示這兩種干預(yù)措施對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用是通過激活RISK途徑實現(xiàn)的。
　　 低氧誘導(dǎo)因子1(hypoxia-induciblefactor1,HIF-1)是在哺乳動物細(xì)胞內(nèi)廣泛表達(dá)的一種異源二聚體。在氧含量正常的情況下，HIF-1的α亞基能夠被迅速降解，該降解過程在低氧狀態(tài)下則被抑制，以允許該亞基聚積并進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)與β亞基結(jié)合，反向激活下游100多種

37、目標(biāo)基因，其中包括影響血管生成、血管反應(yīng)性改變、血管重塑、血管張力調(diào)控、血糖和能量代謝、紅細(xì)胞生成、鐵離子穩(wěn)態(tài)、pH調(diào)節(jié)、細(xì)胞分化和存活、核苷酸代謝、細(xì)胞基質(zhì)代謝和金屬運輸?shù)幕?。因此，在缺氧狀態(tài)下HIF激活具有保護(hù)細(xì)胞和改變代謝的重要作用。HIF-1調(diào)節(jié)是一個復(fù)雜的過程，除了氧濃度及氧感受蛋白之外，PI3K/Akt激酶促生存途徑可能也在HIF蛋白穩(wěn)定方面發(fā)揮著重要的作用。此外，低氧環(huán)境下活性氧生成增多，對HIF-1及其下游基因的轉(zhuǎn)錄是

38、必需的。自2003年Cai等首次報道HIF-1具有心肌保護(hù)作用以來，隨后不斷有研究表明HIF-1在間斷性缺氧、缺血預(yù)處理和缺血后處理過程中發(fā)揮著重要的作用，多種能夠激活HIF-1的藥物（氯化鈷、吸入麻醉藥、脯氨酸羥化酶抑制劑）等均具有心肌保護(hù)作用。此外，通過分子生物學(xué)方法激活HIF-1亦能發(fā)揮心肌保護(hù)作用。雖然目前尚無法確定HIF激活后是通過哪種特異性機制來影響缺血再灌注過程中細(xì)胞的存活，但是很可能是通過多種途徑（包括抗氧化酶、血管生成