血栓素A2和前列環(huán)素在七氟烷后處理誘導大鼠缺血-再灌注心肌保護中的作用.pdf

1、目的：觀察七氟烷后處理對大鼠缺血/再灌注心肌血流動力學、心肌酶的影響，比較缺血/再灌注心肌梗死面積、超微結構、血漿血栓素A2(TXA2)和前列環(huán)素(PGI2)釋放變化，評價七氟烷后處理的心肌保護作用。
　　 方法：
　　 1.動物分組及模型的制備健康雄性成年wistar大鼠（3-4個月）30只，體重250～300g，（河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供許可證號：1012045）隨機分為3組，假手術組（S組）、缺血再灌注組（I/

2、R組）、七氟烷后處理組（Spo組），每組10只。動物麻醉：wistar大鼠術前12h禁食，用3％戊巴比妥鈉(45mg/kg)麻醉后固定在手術臺上，連接心電圖。在頸部正中分離氣管，進行氣管插管，連接呼吸機，呼吸機參數設定為潮氣量5～7m1/100g，呼吸頻率60次/min，吸氣/呼氣為1：2。心肌缺血再灌注模型的準備：開胸暴露心臟后辨認左心耳及肺動脈，用持針器持心外科U型7-0帶針圓線，從左心耳下緣約2mm處進針，肺動脈圓錐左側緣出針，進

3、針深度約1.5mm，進針寬度2～3mm，將針從線上剪掉，將線的兩端打一松扣，墊長約1cm直徑約0.6mm的魚線，相互交叉打結扎緊魚線引起冠狀動脈閉塞造成心肌缺血，用止血鉗夾緊打結處防止線結松落，放開止血鉗抽出魚線恢復冠脈再通。結扎后1～2min內可見心電圖J點或ST段抬高與高聳的T波融合，呈弓背向上單向曲線；左心室前壁變色，局部心肌變蒼白或紫紺；大鼠收縮壓(SBP)下降(大于或等于10mmHg)說明缺血模型建造成功。放松結扎線后，心肌顏

4、色逐漸恢復正常；高聳的T波與抬高的ST段下降說明再灌注模型建造成功。
　　 2.根據組別進行如下處理S組：進入胸腔暴露心臟，用7-0縫線穿過左冠狀動脈左前降支心肌淺層，不阻斷血流，待心電圖恢復穩(wěn)定10min后觀察150min。I/R組：待心電圖恢復穩(wěn)定10min后阻斷血流30min，再灌注120min。Spo組：阻斷血流30min后于再灌注前1min吸入2.5％的七氟烷5min其他同I/R組。分離右頸總動脈用以采血、監(jiān)測動脈血壓

5、。三組分別監(jiān)測心電圖標準Ⅱ導聯。
　　 3.標本的采集及檢測方法于心電圖穩(wěn)定10min(T0)、缺血30min(T1)、再灌注5min(T2)、再灌注10min(T3)、再灌注60min(T4)、再灌注120min(T5)監(jiān)測心率(HR)、平均動脈壓(MAP)，連續(xù)監(jiān)測呼氣末CO2分壓使其維持在正常范圍(35～45mmHg)實驗過程中動脈氧飽和度(SpO2)維持在95％以上，肛溫保持37±0.5℃左右。三組分別于再灌注2h后經頸

6、動脈采血用放射免疫法測定血漿血栓素B2(TXB2)、6-酮前列腺素(6-keto-PGF1α)的濃度，用分光光度法檢測血清CK-MB和LDH的含量。缺血再灌注組（I/R組）、七氟烷后處理組（Spo組）分別取5只測定心肌梗死面積，另外5只留取心肌組織進行透射電鏡觀察。
　　 結果：
　　 1.各組大鼠年齡、體重及身長差異均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）
　　 2.血液動力學變化與S組比較，I/R組、Spo組各時點心率

7、(HR)和平均動脈壓(MAP)顯著降低且有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 與I/R組比較，Spo組于再灌注Smin、再灌注10min心率(HR)明顯下降（P＜0.05）于再灌注10min、再灌注60min、再灌注120min平均動脈壓(MAP)顯著增高（P＜0.05）。
　　 3.6-keto-PGF1α合成的變化以S組比較，I/R組、Spo組6-keto-PGF1α合成增加，均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。與I/R

8、組比，Spo組6-keto-PGF1α合成增高明顯(P＜0.05)。
　　 4.TXB2合成的變化與S組比較，I/R組TXB2合成增加，有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，Spo組TXB2合成增加有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與I/R組比，Spo組無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　 5.TXB2/6-keto-PGF1α變化與S組比較，I/R組增高有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），Spo組增高有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。與I/

9、R組比較，Spo組降低，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）
　　 6.CK-MB的變化與S組比較，I/R組、Spo組血中CK-MB值顯著升高，均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。與I/R組比較，Spo組血中CK-MB值降低，有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　 7.LDH的變化與S組比較，I/R組、Spo組血LDH值顯著升高，均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。與I/R組比較，Spo組血LDH值降低，有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。

10、r>　　 8.各組大鼠心肌梗死面積的比較與I/R組比較，Spo組心肌缺血區(qū)范圍無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），心肌梗死面積減小有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 9.心肌組織電鏡結果S組：正常肌纖維排列整齊，肌原纖維結構清晰，線粒體與部分線粒體嵴內結構清晰，肌漿網、肌核正常。
　　 I/R組：肌纖維排列紊亂，肌膜下肌原纖維溶解，部分線粒體腫脹線粒體膜不完整，嵴外隙擴張嵴排列紊亂，肌漿網擴張肌核水腫。
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