化痰祛濕活血方治療非酒精性脂肪性肝炎的臨床研究及作用機制探討.pdf

1、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)發(fā)病率逐年增加，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是其向肝硬化、肝功能衰竭發(fā)展的重要環(huán)節(jié)，已成為目前肝病領(lǐng)域的新挑戰(zhàn)。目前尚無專用于治療NASH的藥物，中醫(yī)藥在治療NASH方面具有一定的優(yōu)勢，導(dǎo)師在多年臨床研究基礎(chǔ)上積累了豐富的經(jīng)驗，制定了化痰祛濕活血方有效方劑，經(jīng)臨床應(yīng)用效果良好。為進一步明確其臨床療效和作用機制，開展本研究。
　　 目的：探討化痰祛濕活血方治療NASH的臨床療效和作用機制，為臨床治

2、療NASH提供依據(jù)。
　　 方法：①臨床研究：采用多中心、隨機、陽性對照臨床研究方法，從4個分中心共收集NASH患者202例，分為治療組和對照組，兩組在健康教育、飲食運動基礎(chǔ)上，治療組使用化痰祛濕活血方顆粒劑1劑/d;對照組使用多烯磷脂酰膽堿（易善復(fù)）膠囊,456mg/次,3次/d;療程3個月，隨訪3個月。觀察治療、隨訪后患者血清ALT、TG、AST、TC、肝／脾CT值、癥狀體征、體重指數(shù)等的變化；評價化痰祛濕活血方治療NASH

3、患者的臨床療效。②實驗研究：根據(jù)NASH的發(fā)病機理，選擇與其相關(guān)的血清ALT、AST、TG、TC、肝勻漿游離脂肪酸(FFA)，肝指數(shù)、肝臟病理組織學(xué)，肝組織細胞色素P4502E1(cytochromeP4502E1，CYP2E1)和過氧化物酶體增殖物激活受體α(peroxisomeproliferator-activatedreceptor-α，PPARα)基因表達等作為觀察指標(biāo)。具體的實驗過程是：取SD雄性大鼠72只，隨機分為空白組、

4、模型組、多烯磷脂酰膽堿膠囊組（對照組）和化痰祛濕活血方高（高劑量組）、中（中劑量組）、低（低劑量組）劑量組。使用高脂飼料聯(lián)合腹腔注射四環(huán)素進行造模，第7周實驗結(jié)束時處死全部實驗動物，腹主動脈采血；之后迅速取出肝臟稱肝濕重，留取肝臟標(biāo)本。觀察肝濕重、肝指數(shù)、病理組織學(xué)變化（光學(xué)顯微鏡、透射電鏡），檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、肝勻漿FFA含量、肝組織CYP2E1、PPARα基因表達

5、情況（RT-PCR法檢測）等指標(biāo)。
　　 結(jié)果：臨床及實驗研究結(jié)果分述如下：
　　 1．臨床研究：①治療組與對照組在治療前后降低血清ALT及TG水平均有顯著性差別(P＜0.05)，說明兩組在保肝降酶、降TG方面均具有明顯的作用。兩組間治療后比較治療組在降低ALT、TG方面優(yōu)于對照組，差異有顯著性意義(P＜0.05)。兩組在改善肝/脾CT值治療前后比較有顯著差異(P＜0.05)，兩組間治療后比較也有顯著差異(P＜0.05)

6、。
　　 ②兩組在減輕體重指數(shù)(BMI)方面，治療組、對照組組內(nèi)治療前后比較有顯著性差異(P＜0.05)，治療后兩組比較無顯著性差異(P＞0.05)，說明治療組、對照組均可有效減輕體重指數(shù)。治療組、對照組組內(nèi)治療前后比較癥狀和體征積分有顯著性差異(P＜0.05)。治療組治療后在改善肢體困重、脅脹脅痛、脘腹脹滿、食少納呆、大便溏薄癥狀方面優(yōu)于對照組，差異有顯著性(P＜0.05)。
　　 2.實驗研究結(jié)果顯示：①各用藥組與模

7、型組比較：各用藥組肝指數(shù)、血清ALT、AST、TC、TG和肝勻漿FFA含量均有不同程度下降，以化痰祛濕活血方高、中劑量組療效最優(yōu)（P＜0.01或P＜0.05）?；奠顫窕钛礁?、中、低劑量組及對照組肝組織CYP2E1基因表達水平均有顯著降低(P＜0.01)?；奠顫窕钛礁?、中劑量組PPARα基因表達水平顯著升高(P＜0.01)。
　　 ②化高、中劑量組與對照組相比：高劑量組、中劑量組的肝濕重、病理組織學(xué)改善明顯；血清ALT、A

8、ST、TC、TG、肝勻漿FFA含量顯著降低(P＜0.05)；高劑量組、中劑量組抑制CYP2EI基因表達效果明顯優(yōu)于對照組（P＜0.01或P＜0.05）；化痰祛濕活血方高、中劑量組的PPARα基因表達水平較對照組顯著升高(P＜0.05)化高、中劑量組與低劑量組相比有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05）。化痰祛濕活血方高、中劑量組之間比較無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 ③病理學(xué)觀察：光學(xué)顯微鏡顯示：化痰祛濕活血方高、中劑量

9、組與模型組脂肪變性比較有非常顯著性差異(P＜0.01)，高劑量組與對照組比較有顯著性差異(P＜0.05)，高劑量組與中劑量組比較有顯著性差異(P＜0.05)，高劑量組與低劑量組比較有非常顯著性差異(P＜0.01)，中劑量組與低劑量組比較有顯著性差異(P＜0.05)。透射電鏡顯示：與模型組相比，對照組、高劑量組、中劑量組均可升高肝細胞線粒體體密度(Vv)、比膜面(δm)、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)比膜面(δm)，有顯著性差異(P＜0.01)，均可降低肝細

10、胞內(nèi)脂滴體密度(Vv)、線粒體比表面(δ)，有顯著性差異(P＜0.01)。高劑量組優(yōu)于中劑量組和對照組(P＜0.01)，中劑量組與對照組效果相當(dāng)。
　　 結(jié)論：①化痰祛濕活血方治療非酒精性脂肪性肝炎痰濕瘀阻證患者在降低血清ALT、TG，提高肝/脾CT值，改善癥狀體征方面優(yōu)于多烯磷脂酰膽堿膠囊，與多烯磷脂酰膽堿膠囊均有降低患者BMI作用?；奠顫窕钛竭m用于非酒精性脂肪性肝炎（痰濕瘀阻證）的患者，尚未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)，是一種有效安全的

11、方藥。
　　 ②采用高脂飼料聯(lián)合四環(huán)素腹腔注射，造模時間短，成功率高，是一種較為理想的大鼠NASH造模方法?；奠顫窕钛礁鲃┝拷M均可有效降低NASH模型大鼠的肝濕重、肝指數(shù)、血清ALT、AST、TC、TG及肝勻漿FFA水平，改善病理組織學(xué)變化，具有顯著的抗脂肪肝作用；化痰祛濕活血方可激活PPARαmRNA表達，糾正肝臟脂質(zhì)代謝紊亂；同時可抑制CYP2E1mRNA表達，阻止脂質(zhì)過氧化反應(yīng)?；奠顫窕钛皆谠鰪姶笫驪PARα的表達