糖尿病大鼠血糖控制前后腎小管上皮細胞E2A和Id2蛋白表達變化的研究.pdf

1、目的：動態(tài)觀察分化抑制因子Id2、E2A及E-cadherin蛋白在糖尿病大鼠血糖控制前后腎小管上皮細胞的表達變化，探討三者在腎小管間質纖維化和腎小管上皮細胞向間充質細胞轉分化過程(EMT)中可能發(fā)揮的作用及相互關系。
　　方法：雄性SD大鼠隨機分為正常對照組（N）、糖尿病組（DM），糖尿病胰島素治療組(DMT)。采用鏈脲佐菌素（55mg/kg）尾靜脈注射復制Ⅰ型糖尿病大鼠模型，N組和DM組成模后分別于2周（2w）、8周（8w）、

2、16周（16w）、24周（24w）處死；成模13周起，DMT組大鼠采用胰島素個體化治療，以血糖控制在4-7mmol/L，尿糖陰性為準，分別于16周和24周時處死各組大鼠。生化方法測血糖、24h尿蛋白，并計算腎臟指數。HE染色光鏡下觀察胰腺組織形態(tài)結構的變化，HE、PAS、Masson染色光鏡下觀察腎組織形態(tài)結構的變化。免疫組化觀察大鼠腎臟FN蛋白的表達情況；Western blotting檢測大鼠腎組織Id2、E2A、E-cadheri

3、n、α-SMA蛋白的變化；RT-PCR檢測腎組織Id2 mRNA表達情況。
　　結果：（1）與N組相比，不同時間點DM組大鼠血糖、24h尿蛋白量、腎臟指數均顯著升高(P<0.01)，并出現腎組織形態(tài)學異常改變；而DMT組大鼠血糖、24h尿蛋白量、腎臟指數均低于DM組(P<0.05)，腎纖維化病變改善。（2）與N組大鼠比較，DM大鼠腎組織Id2蛋白和mRNA的表達從2w開始減少，DM16w、24w顯著減少(P<0.05),并伴有E-

4、cadherin的表達減少（P<0.05）、α-SMA表達增加（P<0.05）和FN蛋白的沉積增多（P<0.05）。（3）與DM組相比，DMT組大鼠腎組織Id2蛋白和mRNA表達均明顯增加（P<0.05)，腎組織E2A蛋白表達顯著減少（P<0.05），且E-cadherin的表達增加（P<0.05）、α-SMA表達減少（P<0.05)和FN在間質的沉積減少（P<0.05）。
　　結論：（1）大鼠在持續(xù)糖尿病狀態(tài)中，Id2蛋白在腎小