幼齡糖尿病大鼠早期腎小管葡萄糖轉運蛋白2的表達研究.pdf

1、目的：觀察幼齡糖尿病大鼠各組早期腎小管葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)的表達規(guī)律，探討GLUT2表達和糖尿病腎病(DN)之間的關系。
　　方法：出生后3周健康雄性SD幼齡大鼠50只隨機分成正常組和糖尿病模型組，禁食12小時后，糖尿病組腹腔一次性注射20mg/kg的STZ，對照組采用同等體積的枸櫞酸緩沖液注射，48小時后，采集兩組大鼠鼠尾靜脈血，微量血糖儀測血糖，代謝籠中收集的大鼠尿用尿糖試紙檢測尿糖，以血糖≥16.65mmol/L或

2、尿糖出現(xiàn)+++或以上，符合二者之一為糖尿病大鼠造模成功，實驗期間不給予胰島素及其他任何降糖藥物。在代謝籠中密切觀察并記錄兩組大鼠的日飲水量和24小時尿量情況。代謝籠內監(jiān)測日飲水量、24h尿量變化。正常組和STZ注射后的lW組、2W組、4W組、6W組，至造模成功后稱大鼠體重、血糖、血肌酐、血尿素氮等指標，取兩腎并觀察大體特征和稱取腎重量；其中一腎用于觀察腎臟組織病理學變化、免疫組化法測定腎內葡萄糖轉運蛋白2的表達規(guī)律；液氮保存固定另一腎2

3、～3min后，放入－80℃冰箱內保存，BCA法測定腎小管刷狀緣膜的蛋白濃度，Western blot檢測GLUT2的表達，同時應用圖像分析儀對各組GLUT2的灰度值進行分析及統(tǒng)計學研究。
　　結果：
　　l、幼齡大鼠的DM模型建立成功：各組血糖值均≥16.7mmol∕L，尿糖試紙定性檢測尿糖水平在＋＋＋或以上，隨時間進展糖尿病模型各組糖尿病癥狀逐漸明顯。模型各組的尿微量白蛋白、血肌酐、血尿素氮等比正常組顯著增加。
　　

4、2、免疫組織化學染色結果顯示：GLUT2主要在腎小管上表達，DM組腎小管GLUT2蛋白表達較對照組顯著升高。糖尿病模型自1W組開始GLUT2蛋白在腎小管陽性表達，表達量逐漸增高，和1W組、2W組比，在糖尿病6W組時腎小管GLUT2的表達量最高，差異有顯著意義；1W組、2W組和4W組、6W組的腎GLUT2表達量相比，4W組、6W組糖尿病大鼠腎 GLUT2表達量顯著性增加；分別比較1W組與2W組、4W組與6W組的GLUT2蛋白表達量相比，腎