我國不同地區(qū)手足口病流行特征及免疫應(yīng)答初步分析.pdf

1、手足口病(Hand foot mouth disease,HFMD)是嬰幼兒常見的常見的急性感染性疾病,由多種腸道病毒所引起,尤其以腸道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)和柯薩奇病毒A組16型(Coxsackievirus A16,CA16)為主。自1959年確定以來,在世界各地多次暴發(fā)流行,已引起全世界的普遍關(guān)注。本研究針對我國2010年2月～10月不同地區(qū)所發(fā)生的HFMD進行了研究。
　　1、2010年2月～

2、2010年10月期間,從我國重慶,山東和河南三個地區(qū)的兒童醫(yī)院和地方疾控中心收集HFMD患者臨床糞便樣本872份,采用實時熒光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)法共檢出腸道病毒(Enterovirus,EV)陽性830例,其中EV71陽性351例,CA16陽性264例,其他腸道病毒215例。病例信息分析表明,感染人群主要集中在1～5歲以下兒童,其中EV71感染者的平均年齡2.2(±2.137)歲,CA16感染者的平均年

3、齡2.12(±1.456)歲;雖然男女患者比例是1.84:1,但男女患者病毒的檢出率并不存在統(tǒng)計學(xué)差異;HFMD發(fā)病高峰期主要集中在5月～6月,占總病例數(shù)的81.67％。臨床資料分析表明,重癥病例中,EV71的陽性率遠遠高于CA16陽性率,具有統(tǒng)計學(xué)差異;EV71感染所引發(fā)的臨床癥狀如發(fā)熱、咳嗽、出疹特征、出疹部位、呼吸系統(tǒng)疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、循環(huán)系統(tǒng)疾病和卡他癥狀等臨床癥狀高于CA16感染的患者;發(fā)熱溫度、中性粒細胞、白細胞和紅細胞濃

4、度的臨床檢測結(jié)果也與所感染的病毒型別有關(guān);對重癥病例進行危險因素分析發(fā)現(xiàn),病毒型別與重癥存在統(tǒng)計學(xué)意義。對351個EV71陽性樣本進行VP1全基因擴增,共得到268個VP1全基因,分析發(fā)現(xiàn):268個VP1基因均屬于C基因型中的C4亞型;同一地區(qū)EV71毒株具有更近的親緣關(guān)系,三個地區(qū)流行的VP1基因之間的同源性為93.8%～100%,進化距離0.020～0.023,而這三個地區(qū)EV71流行株與C4亞型的進化距離為0.060～0.066,

5、與C1～C5亞型的進化距離為0.111～0.141。
　　2、2010年4月～8月共收集合格HFMD患者急性期血清樣本368份,用ELISA法對血清中的EV71-IgM和CA16-IgM進行檢測,其中EV71檢出率是76.63%,CA16檢出率是20.92%;結(jié)合HFMD患者臨床癥狀將患者分為重癥和輕癥病例組,結(jié)果顯示重癥和輕癥病例分別占總樣本數(shù)的70.38%和29.61%,與EV71和CA16檢出率相一致;重癥和輕癥病例組中EV

6、71的檢出率分別是82.24%和63.30%,重癥中EV71的檢出率高于輕癥,而CA16在兩個病例組中的檢出率分別是18.53%和26.62%,重癥的檢出率低于輕癥,再次證明EV71是引發(fā)HFMD重癥的重要病原體,與本研究中病原學(xué)的研究結(jié)果一致。對患者發(fā)病天數(shù)進行劃分,結(jié)果顯示隨著發(fā)病天數(shù)的增多,EV71和CA16的檢出率都在升高,發(fā)病3天以后的患者EV71檢出率最高,而CA16的檢出率在發(fā)病2～3天后開始升高,預(yù)計隨著病例數(shù)的增加,這

7、種趨勢會更加明顯。
　　3、本研究通過液相芯片技術(shù)對92例HFMD患者和39例健康對照兒童的血清和腦脊液中的12種細胞因子濃度進行測定發(fā)現(xiàn),病毒性腦炎患者比普通HFMD患者能夠產(chǎn)生更強的免疫應(yīng)答反應(yīng);EV71感染的HFMD患者細胞因子的表達水平顯著高于CA16感染的HFMD患者;在血清中,相比于感染EV71引發(fā)病毒性腦炎的患者,感染CA16的患者所表達的細胞因子水平與同時感染EV71和CA16的患者基本相同,說明感染CA16并不影

8、響細胞因子在血清中的表達水平,但是在腦脊液中IL-6的表達水平受到CA16的影響;對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析得出,IL-17A、IL-23、IL-10、IL-4和IFN-γ是HFMD患者病毒性腦炎的危險因素。重癥病例中IFN-γ的表達水平相對較高,多因素分析表明IFN-γ的低水平表達與病毒性腦炎發(fā)病風(fēng)險相關(guān),IL-4的高表達會增加病毒性腦炎的危險,但IL-10對病毒性腦炎的發(fā)病具有保護性,IL-17A的低表達可能與病毒性腦炎的保護性相關(guān),其