熱休克蛋白27調(diào)控LPS和IL-1β激活的胞內(nèi)信號(hào)通路的研究.pdf

1、HSP27是小熱休克蛋白家族的一個(gè)重要成員,其生理功能主要包括保護(hù)細(xì)胞免受各種應(yīng)激因素如自由基、高溫、缺血和毒性物質(zhì)的損傷,促進(jìn)蛋白質(zhì)的正確折疊、組裝,參與細(xì)胞的增殖、分化及細(xì)胞凋亡的信號(hào)調(diào)節(jié)等。以往對(duì)HSP27的研究側(cè)重于對(duì)細(xì)胞凋亡的信號(hào)通路的調(diào)控,而在炎癥反應(yīng)的信號(hào)通路方面研究較少。本課題對(duì)HSP27在炎癥反應(yīng)中細(xì)菌脂多糖(LPS)和白介素1(IL-1β)誘發(fā)的信號(hào)通路中的作用進(jìn)行了研究。
　　 在細(xì)菌感染引起的急性炎癥反應(yīng)

2、中,LPS首先激活單核/巨噬細(xì)胞,通過(guò)活化特異性轉(zhuǎn)錄因子來(lái)合成和釋放大量促炎因子,其中TNF-α及IL-1β是公認(rèn)的最為重要的兩種促炎因子,也是LPS引起的感染性疾病最直接和最關(guān)鍵的炎性介質(zhì)。在先前的研究中發(fā)現(xiàn),HeLa細(xì)胞中HSP27可通過(guò)與IKK復(fù)合物的結(jié)合,負(fù)調(diào)控TNFα誘導(dǎo)的NF-κB的信號(hào)通路,而HSP27對(duì)IL-1β引起的NF-κB信號(hào)通路的調(diào)控方式目前了解得還不是很透徹。我們?cè)谶^(guò)表達(dá)(“Overexpression”)或基

3、因敲低(“Knockdown”)HSP27的研究中發(fā)現(xiàn),一方面HSP27通過(guò)與TRAF6發(fā)生的蛋白間相互作用,促進(jìn)了IL-1β引起的TRAF6的泛素化及IKK的激活；另一方面,IL-1β通過(guò)激活p38-MAPKAPK2-HSP27信號(hào)通路,引起HSP27的磷酸化,反過(guò)來(lái)促使HSP27與TRAF6解離,抑制了TRAF6-IKK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,最終導(dǎo)致IKK的活性下調(diào)。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不同于HSP27負(fù)調(diào)控TNFα激活的NF-κB信號(hào)通路

4、,HSP27以反饋調(diào)節(jié)的方式調(diào)節(jié)IL-1β激活的NF-κB信號(hào)通路。
　　 在此基礎(chǔ)上我們進(jìn)一步研究了HSP27對(duì)單核巨噬細(xì)胞中LPS激活的IKK和MAPKs信號(hào)通路及iNOS和COX-2等炎癥相關(guān)蛋白的合成的影響。結(jié)果表明,在單核巨噬細(xì)胞中HSP27通過(guò)影響IKK的信號(hào)通路而不是MAPK信號(hào)通路,增加了LPS刺激的iNOS及COX-2的產(chǎn)生,進(jìn)一步驗(yàn)證了我們?cè)贖eLa細(xì)胞中得到的結(jié)論。
　　 綜上所述,本實(shí)驗(yàn)主要研究了