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1、實(shí)驗(yàn)一:肺復(fù)張手法對(duì)ALI大鼠肺泡上皮細(xì)胞屏障功能的影響目的觀察肺復(fù)張手法對(duì)急性肺損傷(ALI)肺泡上皮細(xì)胞屏障功能的影響。方法靜脈注射內(nèi)毒素復(fù)制ALI模型,隨機(jī)分為四組:(1)對(duì)照組,(2)ALI模型組(ALI組),(3)小潮氣量(vt)通氣組(LV組),(4)肺復(fù)張聯(lián)合小Vt通氣組(SI組),采用控制性肺膨脹(SI)實(shí)施肺復(fù)張手法。機(jī)械通氣4h后,觀察肺組織病理改變,脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的末端標(biāo)記法(TUMEL)檢測(cè)肺泡上皮
2、細(xì)胞凋亡,重力法測(cè)定血管外肺水含量(EVLW),單核素示蹤技術(shù)測(cè)定肺泡上皮細(xì)胞通透性改變,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)肺組織肺泡表面活性蛋白(SP)-C mRNA表達(dá),酶聯(lián)免疫吸附法(EUSA)檢測(cè)肺泡灌洗液白細(xì)胞介素(IL)-6和IL-10濃度。結(jié)果與對(duì)照組相比,ALI組、LV組及SI組肺損傷評(píng)分和EVLW均顯著升高。SI組肺損傷評(píng)分為2.6±0.8,顯著低于AU組和LV組(7.9±1.1、5.7±0.8,q值分別為2.2
3、01、2.201,P<0.05)。LV組肺損傷評(píng)分顯著低于AU組(q=2.201,P<0.05)。LV組凋亡肺泡上皮細(xì)胞散在分布。與LV組相比,SI組凋亡上皮細(xì)胞明顯減少。LV組EVLW為(0.68±0.05)ml,SI組EVUIW顯著降低[(0.57±0.08)ml,q=4.78,P<0.05],但SI組與ALI組EVLW無(wú)顯著性差異。與對(duì)照組相比,ALI組、LV組及SI組肺組織SP-CmRNA表達(dá)均顯著降低(q值分別為5.13、6.
4、90、4.03,P<0.05)。SI組肺組織SP-C mRNA表達(dá)顯著高于LV組(q=2.87,p<0.05),但與ALI組比較無(wú)顯著性差異。SI組肺泡灌洗液IL-6濃度為(2.52±0.93)NG/ML,顯著低于LV組[(3.64±1.10)ng/ml,q=3.03,P<0.05]。SI組肺泡上皮細(xì)胞通透性和肺泡灌洗液中IL-10濃度與ALI組和LV組比較無(wú)顯著性差異。結(jié)論肺復(fù)張手法可以減輕AL肺組織病理?yè)p傷,增加肺泡上皮細(xì)胞SP-C
5、 mRNA的合成,下調(diào)肺部炎癥反應(yīng),改善肺泡上皮細(xì)胞屏障功能。 目的探討肺復(fù)張(RM)后不同潮氣量(Vt)對(duì)急性肺損傷(AU)肺泡上皮細(xì)胞屏障功能的影響。方法靜脈注射內(nèi)毒素(LPS)復(fù)制Au\LI模型,隨機(jī)分為六組:(1)對(duì)照組,(2)ALI模型組(Au組),(3)小Vt(6ml/kg)通氣組(LV組),(4)RM聯(lián)合更小Vt(3ml/kg)通氣組(SISV組),(5)RM聯(lián)合小Vt(6ml/kg)通氣組(SILV組),(6)R
6、M聯(lián)合傳統(tǒng)Vt(12ml/kg)通氣組(SITV組),采用控制性肺膨脹(SI)實(shí)施肺復(fù)張手法。機(jī)械通氣4h,觀察肺組織病理改變,脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)肺泡上皮細(xì)胞凋亡,重力法測(cè)定血管外肺水含量(EVLW),單核素示蹤技術(shù)測(cè)定肺泡上皮細(xì)胞通透性改變,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)肺組織肺泡表面活性物質(zhì)(SP)-C mRNA表達(dá),酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)法檢測(cè)肺泡灌洗液白細(xì)胞介素(IL)-6
7、和IL-10濃度。結(jié)果 SILV組肺損傷評(píng)分為2.6±0.8,顯著低于SISV組和SITV組(4.7±0.8、3.5±0.6,q值分別為4.89、2.09,P<0.05)。SILV組肺損傷評(píng)分顯著低于ALI組和LV組(7.9±1.1、5.7±0.8,q值分別為12.05、7.09,P<0.05)。SILV組與AU組凋亡上皮細(xì)胞散在分布。與LV組相比,SILV組凋亡上皮細(xì)胞明顯減少。SILV組凋亡上皮細(xì)胞顯著少于SISV組和SITV組。L
8、v組EVLW為(0.68±0.05)ml,SILV組EVLW顯著降低[(0.57±0.08)ml,q=2.42,P<0.05]。SILV組EVLW顯著低于SISV組和SITV組[(0.7l±0.07)、(0.74±0.16)ml,q值分別為2.94、4.43,P<0.05],但與AU組比較無(wú)顯著性差異。SILV組EVLW與SITV組比較無(wú)顯著性差異。與LV組相比,SILV組肺組織SP-C mRNA表達(dá)顯著增加(q=3.45,P<0.05
9、)。SILV組肺組織SP-CmRNA表達(dá)顯著高于SISV組和SITV組(q值分別為3.38、4.96,P<0.05)。SILV組肺泡灌洗液中IL-6濃度為(2.52±0.93)ng/ml,顯著低于LV組、SISV組和SITV組[(3.64±1.10)、(3.81±1.41)、(4.40±1.76)ng/ml,q值分別為2.34、2.72、3.99,P<0.05],但與AU組比較無(wú)顯著性差異。SILV組幾-10濃度較SITV組顯著降低[(
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