不同轉(zhuǎn)移潛能喉癌細(xì)胞株的分離及生物學(xué)特性比較.pdf

1、目的：獲得高侵襲性喉癌細(xì)胞株,為建立高轉(zhuǎn)移喉癌動物模型奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：改良侵襲實驗篩選出高低兩種侵襲潛能喉癌細(xì)胞亞群,通過檢測兩種侵襲潛能喉癌細(xì)胞亞群的生長曲線、倍增時間和流式細(xì)胞術(shù)來測定兩種細(xì)胞的生長和周期差異；采用侵襲實驗、遷移實驗檢測兩種侵襲潛能喉癌細(xì)胞亞群的侵襲和遷移能力的差異；各取5只裸鼠進(jìn)行移植瘤接種動物實驗來檢測兩種侵襲潛能喉癌細(xì)胞亞群在體內(nèi)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移能力的差異。RT-PCR及免疫組化檢測兩種侵襲潛能喉

2、癌細(xì)胞亞群VEGF-C的表達(dá)差異。
　　 結(jié)果：經(jīng)過改良侵襲實驗篩選出了高低兩種侵襲潛能細(xì)胞亞群,高侵襲潛能細(xì)胞亞群倍增時間為31.64±1.08 h,低侵襲潛能細(xì)胞亞群倍增時間為60.24±11.09 h(P<0.05)；高侵襲潛能細(xì)胞亞群增殖指數(shù)為(27.56±0.51)％,低侵襲潛能細(xì)胞亞群增殖指數(shù)為(16.25±0.81)％(P<0.01)；高侵襲潛能細(xì)胞亞群侵襲細(xì)胞數(shù)為210.20±12.93,低侵襲潛能細(xì)胞亞群侵襲細(xì)

3、胞數(shù)為11.60±4.98(P<0.01)；高侵襲潛能細(xì)胞亞群遷移細(xì)胞數(shù)為229.80±12.07,低侵襲潛能細(xì)胞亞群遷移細(xì)胞數(shù)為6.00±4.53(P<0.01)。動物實驗中,高低侵襲組在裸鼠體內(nèi)的成瘤時間分別為2周和4周,第5周處死后解剖及病理檢查結(jié)果,高侵襲組3只同側(cè)胭窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、4只同側(cè)腹股溝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、1只對側(cè)腹股溝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；低侵襲組1只同側(cè)腹股溝淋巴結(jié)反應(yīng)性增生,2只同側(cè)腹股溝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；高侵襲潛能組瘤重為(17.0±3

4、.0)mg,低侵襲潛能組瘤重為(9.7+3.8)mg(P<0.05)；高侵襲潛能組瘤內(nèi)血管數(shù)為21.2±4.0,低侵襲潛能組瘤內(nèi)血管數(shù)為1.4士0.9(P<0.01)。高侵襲潛能組VEGF-C的mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)均較低侵襲潛能組更多(P<0.05)。
　　 結(jié)論：成功從喉癌同一親本細(xì)胞系中分離得到了高低兩種侵襲潛能細(xì)胞亞群,高侵襲性亞群的增值能力、侵襲性和轉(zhuǎn)移能力均高于低侵襲性亞群,其惡性程度高于低侵襲性亞群。因為可能是高侵