PASAL1基因在胃癌細胞株中的表達及生物學意義.pdf

1、目的:研究ras蛋白激活物類似物-1(ras protein activator like-1,RASAL1)基因在正常胃黏膜上皮細胞株及胃癌細胞株中的表達情況及其生物學意義。
　　 方法:體外培養(yǎng)人正常胃黏膜上皮細胞株及三種不同分化程度的胃腺癌細胞株,分為正常對照組和高、中、低分化胃腺癌細胞組。采用RT-PCR方法和Western-blot法分別檢測高分化胃腺癌細胞株MKN-28、中分化胃腺癌細胞株SGC-7901、低分化胃腺

2、癌細胞株BGC-823和正常胃黏膜上皮細胞株GES-1中RASAL1基因mRNA水平和蛋白水平的表達,應用基因測序法檢測上述三種胃腺癌細胞株中K-ras基因第一外顯子第12、13密碼子點突變情況,并分析其意義。結(jié)果:(1)RT-PCR結(jié)果顯示,與正常胃黏膜上皮細胞株相比,高、中、低分化胃腺癌細胞株中RASAL1 mRNA的表達量分別下調(diào)47.53％、85.80％、95.86％,差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；且分化程度越低表達下調(diào)

3、越明顯,各分化程度胃腺癌細胞株之間差異亦有統(tǒng)計學意義(F=8098.175,P＜0.01)。(2)Western-blot結(jié)果表明,與正常胃黏膜上皮細胞相比,高、中、低分化胃腺癌細胞株中RASAL1蛋白的表達量分別下調(diào)40.12％、54.94％、63.33％,差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；且分化程度越低表達下調(diào)越明顯,不同分化程度胃腺癌細胞株之間的差異亦有統(tǒng)計學意義(F=3059.420,P＜0.01)。(3)經(jīng)PCR擴增后基因測