吲哚胺2，3-二氧化酶(IDO)與乙肝免疫耐受相關(guān)性研究.pdf

1、目的：最近研究發(fā)現(xiàn)，吲哚胺2，3-二氧化酶（IDO）在免疫調(diào)控中發(fā)揮著重要作用，可能是打破乙肝免疫耐受的重要靶點(diǎn)之一，但其具體機(jī)制尚不明確。本文通過(guò)觀察吲IDO的表達(dá)與乙肝病毒復(fù)制水平，以及T細(xì)胞亞群功能之間的關(guān)系，研究IDO在慢性乙肝免疫耐受中的作用及其可能機(jī)制，為重建機(jī)體主動(dòng)免疫提供一個(gè)新途徑。 方法：1.病例選擇試驗(yàn)組：我院肝膽外科2007年9月至2008年1月，50例慢性乙肝患者，年齡28～65歲（43.9±56.1）歲

2、；其中男38例，女12例；病程1個(gè)月到30年，中位數(shù)125個(gè)月。對(duì)照組：我院體檢中心同期50例健康體檢人員，年齡18～70歲；（33.9±68.1）歲；其中男28例，女22例。排除標(biāo)準(zhǔn)：<18歲或>80歲，接受過(guò)激素治療，乙肝患者入院前2周接受過(guò)抗病毒治療，合并HCV感染，患有免疫缺陷病，血液系統(tǒng)疾病，機(jī)體有感染灶，包括膽道感染，病人不同意。2.標(biāo)本采集和處理方法采集50例慢性乙肝患者外周靜脈血內(nèi)淋巴細(xì)胞和血清，分別置于-80℃冷凍待測(cè)

3、，同時(shí)采集同期50例健康體檢人員外周靜脈血淋巴細(xì)胞和血清作正常對(duì)照組。實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time fluorescence quantitative PCR，RT-PCR）法檢測(cè)兩組標(biāo)本淋巴細(xì)胞IDOmRNA表達(dá)；免疫印跡法（Western-Blot）檢測(cè)兩組標(biāo)本淋巴細(xì)胞IDO蛋白含量；反相高效液相色譜法（RP-HPLC）檢測(cè)兩組標(biāo)本血清IDO活性；免疫熒光定量法（Quantitative immunofluorescenc

4、e method）測(cè)定試驗(yàn)組乙肝病毒復(fù)制水平（HBV-DNA）；流式細(xì)胞儀（Flow cytometry）檢測(cè)試驗(yàn)組T淋巴細(xì)胞亞群功能（Function of T-lymphocyte subsets）。試驗(yàn)組患者的ALT數(shù)據(jù)自其病案中讀取。 結(jié)果：1.乙肝患者IDO mRNA、IDO蛋白定量、IDO表達(dá)活性均明顯高于健康體檢人群[mRNA：（2.110±0，615）×103 vs（0.143±0.026）×103；蛋白定量：0

5、.22±0.06 vs0.02±0.0017；表達(dá)活性：26.07±8.12vs4.98±1.65；P<0.05].2.IDO mRNA與HBV（r=0.502，P<0.001）和ALT（r=0.65，P<0.01）均呈正相關(guān)。3.乙肝組（CD4：28.66±13.92，CD8：21.06±6.05，CD4/CD8：1.3±0.35）的CD4（+）T細(xì)胞和CD8（+）T細(xì)胞百分比，以及CD4/CD8比值明顯低于正常對(duì)照組（CD4：49.

6、80±10.68，CD8：29.90±2.53，CD4/CD8：1.7±0.65），P<0.05]。4.IDOmRNA，蛋白定量和表達(dá)活性均與CD4（+）T cells（r=-0.622，-0.682，-0，549，P<0.05），CD8（+）T cells（r=-0.487，-367，-294，P<0.05）以及CD4/CD8比值（r=-0.426，-0.533，-0.397，P<0.05）負(fù)相關(guān)。 結(jié)論：IDO與乙肝病毒復(fù)制