乙肝相關(guān)慢加亞急性肝衰竭患者外周血Th17、Treg及CTL細(xì)胞的變化及臨床意義的初步探討.pdf

1、背景：我國慢加亞急性肝衰竭病死率高達(dá)60％-80%。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前認(rèn)為宿主免疫調(diào)節(jié)的紊亂是造成肝臟病變的重要原因。其中T細(xì)胞亞群介導(dǎo)的細(xì)胞免疫以及細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控異常起著重要的作用。最近，一種新的效應(yīng)CD4+T細(xì)胞亞群Th17被廣泛關(guān)注，具有很強(qiáng)的促炎癥作用，以分泌白介素17(IL-17)為特征。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)是體內(nèi)重要的具有免疫調(diào)節(jié)功能的CD4+T細(xì)胞亞群，具有免疫無能和免疫抑制兩大功能特征，可通過細(xì)胞間的直接接觸、

2、分泌抑制性細(xì)胞因子等多種方式發(fā)揮抑制作用，具有抗炎癥作用。細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CD8+CD28+即CTL)在抗病毒、自身免疫等方面起重要作用，主要是通過細(xì)胞毒機(jī)制、非細(xì)胞毒機(jī)制兩種途徑特異性地殺傷靶細(xì)胞。Th17、Treg及CTL在慢性乙型病毒性肝炎中的研究已見報(bào)道，但上述三者是否參與了乙肝相關(guān)慢加亞急性肝衰竭(HBV-SACLF)發(fā)病的過程及在肝衰竭不同階段的動(dòng)態(tài)變化、三者之間的相關(guān)性研究尚未見報(bào)道。
　　 目的：探討HBV-SA

3、CLF患者外周血Th17、Treg、CTL細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化趨勢、三者之間的相關(guān)性及與預(yù)后的關(guān)系。
　　 方法：采用流式細(xì)胞儀檢測39例HBV-SACLF患者、20例慢性乙型肝炎患者(CHB)、15例正常人，外周全血標(biāo)本中Th17、Treg及CTL的比例，比較三組之間上述指標(biāo)的差異;動(dòng)態(tài)觀察HBV-SACLF患者早期、中期、晚期Th17、Treg、CTL的變化趨勢;分析Th17、Treg、CTL細(xì)胞亞群間是否具有相關(guān)性;比較存活組與

4、非存活組Th17、Treg、CTL比例與預(yù)后的關(guān)系。同時(shí)采用ELISA技術(shù)檢測上述三組血清中IL-17的表達(dá)水平，并分析HBV-SACLF患者早期、中期、晚期IL-17的動(dòng)態(tài)變化。
　　 結(jié)果：1.HBV-SACLF組、CHB組及正常對照組Th17、Treg、CTL比例分別為:1）Th17:(4.04±1.22)%、(1.94±0.43)%、(1.01±0.25)%；Th17比例在HBV-SACLF組與CHB組及正常對照組比較，

5、CHB組與正常組比較，均明顯升高，差異均具有顯著性(p1=0.03，p2＜0.001,p3=0.034).2)Treg:(3.79±1.49)%、(8.25±1.23)%、(5.76±1.15)%;Treg比例在HBV-SACLF組較CHB組及正常組均明顯下降，CHB組較正常組明顯升高，差異均具有顯著性(p1＜0.001，p2=0.006，p3=0.007)。3)CTL:(21.12±5.35)%、(13.61±1.41)%、(16.7

6、3±1.20)%；CTL比例在HBV-SACLF組較CHB組及正常組均明顯上升，CHB組較正常組明顯下降，兩組之間比較差異均具有顯著性(p1＜0.001，p2=0.012，p3=0.009)。
　　 2.HBV-SACLF早期、中期、晚期Th17、Treg、CTL的比例分別為:1）Th17:(3.05±0.71)%、(4.07±0.90)%、(5.18±1.10)%；Th17比例在HBV-SACLF早期與中期，中期與晚期相比逐漸

7、升高，兩組之間比較差異均具有顯著性(p1=0.003，p2=0.009)。2)Treg:(5.18±0.68)%、(3.99±0.72)%、(1.87±0.64)%;Treg比例在HBV-SACLF早期與中期，中期與晚期比較逐漸下降，差異均具有顯著性(p1=0.001，p2=0.000)。3)CTL:(22.62±4.99)%、(19.08±3.63)%、(14.48±4.39)%;CTL比例在HBV-SACLF早期與中期，中期與晚期比

8、較逐漸下降，差異均具有顯著性(p1=0.046，p2=0.003)。
　　 3.HBV-SACLF存活組與非存活組Th17比例分別為:(3.44±0.97)%、(4.56±1.20)%；兩組之間比較差異具有顯著性(P=O.003)。且Th17與預(yù)后具有明顯正相關(guān)性(r=0.501，p=0.029)。
　　 4.對HBV-SACLF患者中Th17、Treg及CTL進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn):Th17與Treg存在明顯的負(fù)相關(guān)性(r

9、=-0.532，P＜0.001)；Treg與CTL存在顯著的正相關(guān)性(r=0.339，p=0.035);Th17與CTL無相關(guān)關(guān)系(r=-0.246,p=0.131)。
　　 5.HBV-SACLF組、CHB組及正常對照組IL-17細(xì)胞因子的表達(dá)水平分別為:289.2±83.3、153.3±79.6、62.5±28.5(pg/ml)，HBV-SACLF組與CHB組及正常對照組之間差異均有顯著性意義(p1=0.019，p2=0.0

10、00)。
　　 6.HBV-SACLF早期、中期、晚期IL-17細(xì)胞因子的表達(dá)水平分別為:214.7±47.5、267.7±56.8、317.4±88.1(pg/ml)，在早期與中期、中期與晚期之間差異均有顯著性(p1=0.011,p2=0.007).
　　 結(jié)論：HBV-SACLF患者外周血Th17細(xì)胞比例和IL-17水平明顯升高，且在肝衰竭的進(jìn)展過程中持續(xù)升高，與預(yù)后具有明顯的正相關(guān)性;Treg細(xì)胞比例在HBV-SA