HBV相關(guān)慢加亞急性肝衰竭患者外周血輔助性T淋巴細(xì)胞及相關(guān)炎癥因子的表達(dá)和臨床意義的初步探討.pdf

1、背景在我國(guó)，慢性乙型病毒性肝炎(CHB)是引起慢加亞急性肝衰竭(SACLF)的主要病因，有報(bào)道稱(chēng)CHB占SACLF所有病因的80%。目前認(rèn)為，HBV感染患者病情進(jìn)展和轉(zhuǎn)歸受諸多因素影響，其中宿主的免疫功能發(fā)揮了重要作用，細(xì)胞因子在調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答中扮演了關(guān)鍵角色。輔助性T細(xì)胞（Th細(xì)胞）根據(jù)分泌的細(xì)胞因子不同分為：Th0、Th1、Th2、Th3，目前研究最多的是Th1和Th2兩個(gè)亞型。研究認(rèn)為在病毒性肝炎感染中，Th1細(xì)胞有利于病毒的清除，

2、而Th2細(xì)胞主要與組織損傷及慢性化有關(guān)。最近， CD4+Th細(xì)胞家族新型成員-Th17細(xì)胞亞群的出現(xiàn)改寫(xiě)了經(jīng)典的Th1/Th2細(xì)胞反應(yīng)模式。該細(xì)胞以高分泌IL-17為特征，具有很強(qiáng)的促炎癥作用。2005年Kim等人發(fā)現(xiàn)了IL-32，該因子可由T細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞、上皮細(xì)胞產(chǎn)生，進(jìn)一步研究表明其有促炎癥因子的特性。IL-10是機(jī)體一種強(qiáng)有力的免疫和炎癥抑制因子，由Th2細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞（Dendritic cells，DC

3、）和B細(xì)胞等產(chǎn)生，它可以減低T細(xì)胞活性，從而降低免疫反應(yīng)的效應(yīng)，導(dǎo)致機(jī)體清除病毒能力減弱。上述細(xì)胞及細(xì)胞因子在CHB中的變化已有報(bào)道，但其是否參與了HBV相關(guān)慢加亞急性肝衰竭（HBV-SACLF）的發(fā)病過(guò)程以及在肝衰竭病程中的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)、與ALT的相關(guān)性研究未見(jiàn)報(bào)道。
　　目的：探討HBV-SACLF患者外周血Th1、Th2、Th17及血清中IL-32、IL-10的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)及其臨床意義。
　　方法：采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)

4、38例HBV-SACLF患者、46例肝衰竭前期患者、20例CHB患者、20例健康體檢者（對(duì)照組），外周全血標(biāo)本中Th1、Th2、Th17的表達(dá)水平，比較四組之間上述指標(biāo)的差異；動(dòng)態(tài)觀(guān)察HBV-SACLF患者早、中、晚期Th1、Th2、Th17的變化趨勢(shì)；比較感染組與非感染組、存活組與非存活組Th1、Th2、Th17表達(dá)水平的變化；分析Th1、Th2、Th17與ALT的相關(guān)性。同時(shí)采用ELISA檢測(cè)上述四組血清中 IL-32、IL-10的

5、表達(dá)水平，并觀(guān)察 IL-32、IL-10在 HBV-SACLF患者早、中、晚期的動(dòng)態(tài)變化。
　　結(jié)果：1.HBV-SACLF組、肝衰竭前期組、CHB組、對(duì)照組 Th1、Th2、Th17的表達(dá)水平分別為：①Th1：（22.58±3.86）%、（20.80±3.32）%、（5.23±1.51）%、（6.45±1.27）%；Th1比例在HBV-SACLF組與CHB組及對(duì)照組比較，均明顯升高，差異具有顯著性（P2=0.04，P3=0.03

6、2）。②Th2：（1.73±0.64）%、（1.03±0.34）%、（6.15±0.97）%、（1.98±0.46）%；Th2比例在HBV-SACLF組與CHB組及對(duì)照組比較，均明顯下降，差異具有顯著性（P2=0.007，P3=0.041）。③Th17：（3.48±0.80）%、（3.61±1.20）%、（1.09±0.4）%、（0.72±0.11）%；Th17比例在HBV-SACLF組與CHB組及對(duì)照組比較，均明顯升高，差異具有顯著性

7、（P2=0.003，P3<0.001）。
　　2.HBV-SACLF早期、中期、晚期Th1、Th2、Th17的表達(dá)水平分別為：①Th1：（26.11±5.19）%、（22.45±4.06）%、（18.33±3.21）%；Th1比例在HBV-SACLF早期與中期，中期與晚期相比逐漸降低，兩組之間比較差異均具有顯著性(P1=0.001， P2=0.004)。②Th2：（0.95±0.20）%、（1.66±0.41）%、（2.54±1.

8、03）%；Th2比例在HBV-SACLF早期與中期，中期與晚期相比逐漸升高，兩組之間比較差異均具有顯著性(P1=0.003，P2=0.048)。③Th17：（2.71±0.34）%、（3.39±0.73）%、（4.45±1.22）%；Th17比例在HBV-SACLF早期與中期，中期與晚期相比逐漸升高，兩組之間比較差異均具有顯著性(P1=0.002，P2=0.007)。
　　3.HBV-SACLF感染組與非感染組Th1、Th2、Th

9、17的表達(dá)水平分別為：①Th1：（23.59±3.91）%、（21.44±3.51）%；兩組比較差異無(wú)顯著意義。②Th2：（1.92±0.70）%、（1.76±0.55）%；兩組比較差異無(wú)顯著意義。③Th17：（4.65±1.33）%、（3.92±1.27）%，兩組比較差異具有顯著性（P=0.032）。
　　4.HBV-SACLF存活組與非存活組Th1、Th2、Th17的表達(dá)水平分別為：①Th1：（20.78±3.37）%、（25

10、.61±4.05）%；兩組比較差異無(wú)顯著意義。②Th2：（1.65±0.59
　?。?、（1.88±0.63）%；兩組比較差異無(wú)顯著意義。③Th17：（3.21±1.02）%、（4.53±1.29）%，兩組比較差異具有顯著性（P=0.029）。
　　5.對(duì)HBV-SACLF患者Th17、Th1、Th2與ALT進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Th17與ALT呈正相關(guān)（r=0.616，P=0.044），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；

11、Th1、Th2與ALT無(wú)明顯相關(guān)性。
　　6. HBV-SACLF組、肝衰竭前期組、CHB組、對(duì)照組IL-32、IL-10的表達(dá)水平分別為：①I(mǎi)L-32：（500.98±152.33）pg/ml、（486.45±129.06）pg/ml、（281.72±99.28）pg/ml、（178.16±50.54）pg/ml；IL-32在HBV-SACLF組與CHB組及對(duì)照組比較，均顯著升高，差異具有顯著性（P2=0.021，P3=0.03

12、3）。②IL-10：（2.82±1.03）pg/ml、（3.05±1.83） pg/ml、（13.15±3.37）pg/ml、（7.62±2.17）pg/ml；IL-10在 HBV-SACLF組與CHB組及對(duì)照組比較，均顯著下降，差異具有顯著性（P2=0.024，P3=0.019）。
　　7. HBV-SACLF早期、中期、晚期 IL-32、IL-10的表達(dá)水平分別為：①I(mǎi)L-32：（540.69±155.71）pg/ml、（49

13、8.43±135.56）pg/ml、（450.77±102.33）pg/ml；IL-32在HBV-SACLF早期與中期，中期與晚期相比逐漸降低，兩組之間比較差異均具有顯著性(P1=0.046，P2=0.001)。②IL-10：（1.94±0.44）pg/ml、（2.83±0.97）pg/ml、（3.69±1.23） pg/ml；IL-10在HBV-SACLF早期與中期，中期與晚期相比逐漸升高，兩組之間比較差異均具有顯著性(P1=0.00

14、4，P2=0.032)。
　　結(jié)論：Th1細(xì)胞和IL-32在HBV-SACLF患者中明顯升高，隨著病情發(fā)展呈逐漸下降趨勢(shì)；Th2細(xì)胞和IL-10在HBV-SACLF患者中明顯降低，其在HBV-SACLF早、中、晚期逐漸升高；Th17細(xì)胞在HBV-SACLF患者中明顯升高，隨著病情發(fā)展呈逐漸升高趨勢(shì)；繼發(fā)感染組Th17細(xì)胞較非感染組明顯升高；存活組Th17細(xì)胞低于非存活組；且Th17細(xì)胞與肝細(xì)胞損害呈正相關(guān)。本文研究輔助性T細(xì)胞1、