HBV相關(guān)慢加急性肝衰竭患者肝組織和血清中基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α的變化及其意義.pdf

1、目的:乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)相關(guān)慢加急性肝衰竭（acute-on-chronicliverfailure，ACLF）是在慢性乙型肝病基礎(chǔ)上發(fā)生的嚴(yán)重肝功能損害，出現(xiàn)以黃疸、肝性腦病和腹水等為主要表現(xiàn)的臨床綜合征，其發(fā)病急，病情兇險(xiǎn)，病死率高且治療方法有限。來自骨髓的干細(xì)胞可遷移到損傷肝臟，通過分化為肝細(xì)胞修復(fù)損傷肝組織。本研究通過觀察HBV相關(guān)ACLF患者肝組織及血清中基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(stroma

2、lcellderivedfactor-1α，SDF-1α)的水平及肝組織Ki-67的表達(dá)，同時(shí)比較不同預(yù)后ACLF患者血清SDF-1α水平，初步探討SDF-1α在ACLF患者肝干細(xì)胞歸巢中的作用。
　　 方法:收集2011年3月至2012年11月于河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院和石家莊市第五醫(yī)院住院患者，共57例，其中HBV相關(guān)ACLF患者30例，慢性乙型肝炎(chronichepatitisBCHB)患者27例，另外選取同期河北醫(yī)科大學(xué)

3、第三醫(yī)院健康體檢者20例作為健康對(duì)照組。另外收集接受肝移植的ACLF患者及肝組織活檢的CHB患者肝組織各10例，正常供體肝組織8例。HBV相關(guān)ACLF和CHB的診斷分別符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)及肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合制定的2006年版《肝衰竭診療指南》和2010年版《慢性乙型肝炎防治指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。檢測(cè)患者血清生化指標(biāo)、凝血功能及HBVDNA載量，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)肝組織SDF-1αmRNA的表達(dá)，免疫組織化學(xué)檢測(cè)肝組織內(nèi)SDF-

4、1α及Ki-67蛋白的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清SDF-1α的水平。比較血清SDF-1α水平在ACLF患者存活組和死亡組間的差異，并與HBVDNA載量及終末期肝病模型(modelofend-stageliverdisease，MELD)評(píng)分進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果:
　　 1、ACLF組、CHB組及健康對(duì)照組人口學(xué)及臨床特點(diǎn)
　　 各組患者的年齡和性別比例具有可比性。ACLF組患者血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(al

5、anineaminotransferase，ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartateaminotransferase，AST）、總膽紅素(totalbilirubin，TBIL)、直接膽紅素(directbilirubin，DBIL)、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(internationalnormalizedratio，INR)水平明顯高于CHB組及健康對(duì)照組（P均＜0.01），ACLF組和CHB組HBVDNA載量無明顯差異(P＞0.05)

6、。
　　 2、ACLF患者肝組織SDF-1αmRNA表達(dá)增多
　　 共8例HBV相關(guān)ACLF患者、10例CHB患者和8例健康對(duì)照者接受SDF-1αmRNA表達(dá)檢測(cè)。ACLF組肝組織SDF-1αmRNA表達(dá)（3.4±1.02）顯著高于CHB組（2.16±1.19）和健康對(duì)照組(1.00)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)。同樣，CHB組與健康對(duì)照組比較，差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　

7、 3、ACLF患者肝組織SDF-1α及Ki-67蛋白表達(dá)增多
　　 共10例HBV相關(guān)ACLF患者、10例CHB患者和6例健康對(duì)照者接受肝組織SDF-1α及Ki67表達(dá)檢測(cè)。ACLF患者匯管區(qū)膽管上皮細(xì)胞和肝臟干細(xì)胞高表達(dá)SDF-1α，且伴明顯的小管樣反應(yīng)，而健康對(duì)照者僅在膽管上皮細(xì)胞表達(dá)SDF-1α，其陽性染色平均吸光度值分別為（0.345±0.095）、（0.178±0.116）、(0.051±0.022)。ACLF患者匯管

8、區(qū)內(nèi)可見大量的Ki-67+細(xì)胞，肝實(shí)質(zhì)內(nèi)亦可見散在分布的陽性細(xì)胞，其陽性細(xì)胞數(shù)依次為（171.2±52.8）、（42.4±17.8）和（4.7±1.9）/高倍視野，各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01），其中以ACLF組為最高，健康對(duì)照組最低。
　　 4、ACLF患者血清SDF-1α水平降低
　　 共30例HBV相關(guān)ACLF患者、27例CHB患者和20例健康對(duì)照者接受血清SDF-1α水平檢測(cè)。ACLF組血清SDF

9、-1α水平（1717.33±458.07pg/ml）顯著低于CHB組（2638.96±574.04pg/ml）及健康對(duì)照組（2378.20±660.09pg/ml）（P均＜0.01）。而CHB組與健康對(duì)照組相比，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05）。
　　 5、不同預(yù)后ACLF患者血清SDF-1α水平變化
　　 共30例不同預(yù)后的HBV相關(guān)ACLF患者接受血清SDF-1α水平檢測(cè)。根據(jù)患者第28天的生存狀況，分為存活組（11

10、例）和死亡組（19例）。存活組患者入院時(shí)血清SDF-1α水平（1497.69±408.55pg/ml）低于死亡組患者（1844.50±445.84pg/ml），兩組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　 6、ACLF患者血清SDF-1α水平與HBVDNA及MELD評(píng)分的相關(guān)性
　　 ACLF患者血清SDF-1α水平與HBVDNA載量(r=0.21，P=0.27)及MELD評(píng)分(r=0.17，P=0.38)無相關(guān)