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文檔簡介
1、目的:探討HBX調(diào)節(jié)miR-101的表達(dá)在HBV相關(guān)性肝癌發(fā)生發(fā)展中的分子機(jī)制。
方法:采用Real-time PCR方法檢測(cè)HBV相關(guān)性肝癌組織標(biāo)本和肝癌細(xì)胞目的基因的mRNA表達(dá)水平及運(yùn)用Western blot方法檢測(cè)HBV相關(guān)性肝癌組織標(biāo)本和肝癌細(xì)胞目的基因的蛋白表達(dá)水平;運(yùn)用體外雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)miR-101與其靶基因DNMT3A的結(jié)合情況;通過體外轉(zhuǎn)染的方法研究miR-101的相關(guān)功能。
結(jié)果: m
2、iR-101在表達(dá)HBX的肝癌細(xì)胞株呈現(xiàn)低表達(dá),miR-101在HBV相關(guān)性肝癌組織比相應(yīng)的癌旁組織表達(dá)降低,且miR-101的表達(dá)量與DNMT3A的mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān);雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)證明miR-101可以通過直接與DNMT3A的3'-UTR區(qū)發(fā)生互補(bǔ)結(jié)合,從而抑制其mRNA和蛋白表達(dá)水平;HBX通過miR-101調(diào)節(jié)DNMT3A影響抑癌基因的甲基化而調(diào)控其表達(dá)。
結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)證明了HBX通過調(diào)節(jié)miR-101參與了HB
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