RUNX3、DNMT3b與子宮內(nèi)膜癌的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:子宮內(nèi)膜癌是女性生殖道三大惡性腫瘤之一,占女性生殖道惡性腫瘤的20％～30％,而且發(fā)病率有逐年增高趨勢。其發(fā)生、發(fā)展是多基因、多因素共同作用的結(jié)果。近年研究發(fā)現(xiàn),DNA甲基化是許多抑癌基因表達(dá)缺失的表遺傳學(xué)因?yàn)?與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。DNA甲基化是由DNA甲基轉(zhuǎn)移酶((DNAmethyltransferases,DNMTs)催化發(fā)生的,DNMT3b基因(DNA methyltransferase3b,DNMT3b)是DNMT

2、s家族成員之一,位于20q11.2,cDNA全長4195bp,編碼853個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。其功能主要是參與從頭甲基化(de novo methylation),即在沒有甲基化的DNA雙鏈上進(jìn)行甲基化的過程。研究發(fā)現(xiàn),啟動(dòng)子CpG島高甲基化是抑癌基因表達(dá)沉默的重要機(jī)制之一。DNMT3b的增加是引起CpG島高甲基化的因?yàn)橹?。許多研究顯示,DNMT3b在多種腫瘤細(xì)胞和組織中存在不同程度的高表達(dá),且與抑癌基因啟動(dòng)子高甲基化狀態(tài)有明顯相關(guān)性。R

3、UNX3基因(runt-related transcriptionfactor3 gene)是Levanon等于1994年發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因,含有6個(gè)外顯子,總長約為67 kb。RUNX3能調(diào)控細(xì)胞的生長發(fā)育和凋亡,對細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和其他生物學(xué)效應(yīng)有著重要而復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用,RUNX3表達(dá)缺失在人類多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用而倍受關(guān)注。啟動(dòng)子區(qū)域的高甲基化是RUNX3失活的主要機(jī)制。本文旨在通過研究RUNX3、DNMT3

4、b在正常子宮內(nèi)膜、不典型增生子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá),以及與子宮內(nèi)膜癌臨床各病理參數(shù)之間的相關(guān)性,探討其在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展中的作用,為子宮內(nèi)膜癌的早期診斷、治療提供新靶點(diǎn)。
　　 方法:
　　 選擇2006年12月-2009年9月在邢臺市人民醫(yī)院婦科住院手術(shù)治療,經(jīng)病理證實(shí)為不典型增生子宮內(nèi)膜標(biāo)本22例,子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本56例,以正常子宮內(nèi)膜標(biāo)本20例作為對照。所有病例術(shù)前均未接受放、化療及性激素治療。采用免疫組織

5、化學(xué)的方法檢測三組中RUNX3、DNMT3b的表達(dá)情況,根據(jù)細(xì)胞內(nèi)染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)分級。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料采用(Chi-Square Test)X2檢驗(yàn)、X2Fisher’s Exact Test檢驗(yàn),計(jì)量資料采用單因素方差分析(one-way ANOVA),兩變量間的相關(guān)分析用Spearman等級相關(guān)分析。以a=0.05作為差異顯著性水準(zhǔn),當(dāng)P<0.05有顯著性差異,P<0.01有極顯著性差異。

6、r>　　 結(jié)果:
　　 1 RUNX3的表達(dá):
　　 RUNX3在正常子宮內(nèi)膜、不典型增生子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中的陽性表達(dá)率分別為90.00％、63.64％、44.64％。不典型增生子宮內(nèi)膜與正常子宮內(nèi)膜比較,差異有顯著性(x2=7.984,p<0.05)；子宮內(nèi)膜癌與正常子宮內(nèi)膜比較,差異有極顯著性(x2=35.368,p<0.01)；子宮內(nèi)膜癌與不典型增生子宮內(nèi)膜比較,差異有極顯著性(x2=14.904,p<0

7、.01)。
　　 2 DNMT3b的表達(dá):
　　 DNMT3b在正常子宮內(nèi)膜、不典型增生子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中的陽性表達(dá)率分別為10.00％、45.46％、72.43％。不典型增生子宮內(nèi)膜與正常子宮內(nèi)膜比較,差異有顯著性(x2=7.923,p<0.05)；子宮內(nèi)膜癌與正常子宮內(nèi)膜比較,差異有極顯著性(x2=24.150,p<0.01)；子宮內(nèi)膜癌與不典型增生子宮內(nèi)膜比較,差異有顯著性(x2=8.105,p<0.05)

8、。
　　 3相關(guān)性:
　　 3.1 RUNX3與子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系
　　 RUNX3在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與手術(shù)病理分期、組織學(xué)分級密切相關(guān)(x2=11.565,X2=10.636,p<0.01,p<0.01),與病理分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性(x2=0.048,x2=0.348,P>0.05,P>0.05)。
　　 3.2 DNMT3b與子宮內(nèi)膜癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系
　　 DNMT3b在子

9、宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與手術(shù)病理分期、組織學(xué)分級密切相關(guān)(x2=7.798,x2=12.337,p<0.05,p<0.01),與病理分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性(x2=0.351,x2=0.075,p>0.05,p>0.05)。
　　 3.3 RUNX3與DM3b相關(guān)性
　　 應(yīng)用Spearman等級相關(guān)分析發(fā)現(xiàn),在子宮內(nèi)膜癌組織中RUNX3與DNMT3b表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.705,P<0.01)。
　　 結(jié)論:

10、>　　 1 RUNX3在正常子宮內(nèi)膜、不典型增生子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)呈階梯下降趨勢。DNMT3b在正常子宮內(nèi)膜、不典型增生子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)呈依次升高趨勢。它們的異常表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。聯(lián)合檢測兩者可能有助于子宮內(nèi)膜癌的早期診斷。
　　 2 RUNX3的表達(dá)缺失和DNMT3b的表達(dá)增高均與子宮內(nèi)膜癌的病理分期和組織分化程度有關(guān),隨著子宮內(nèi)膜癌病理分期增高、組織分化程度越低,DNMT3b的