糖皮質(zhì)激素保護(hù)血管內(nèi)皮炎性損傷的受體前調(diào)節(jié)機(jī)制.pdf

1、本實驗以內(nèi)毒素脂多糖LPS(LPS)致傷體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)，然后觀察糖皮質(zhì)激素(Dex)對HUVEC受傷前后不同時點表達(dá)IL-6、ICAM-1等細(xì)胞因子的影響，及HUVEC發(fā)生凋亡的情況，以確定其對血管內(nèi)皮的炎性損傷是否具有保護(hù)作用。然后用RT-PCR等方法觀察人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞糖皮質(zhì)激素受體(GR)、鹽皮質(zhì)激素受體(MR)及糖皮質(zhì)激素受體前調(diào)節(jié)的關(guān)鍵酶11β-羥基類固醇脫氫酶(，11β-HSD)基因的表達(dá)變化，并觀

2、察11β-HSD的經(jīng)典抑制劑甘草次酸(GA)在其中的作用。力圖闡明糖皮質(zhì)激素保護(hù)血管內(nèi)皮炎性損傷的受體前調(diào)節(jié)機(jī)制，探討其在ARDS治療中的意義。 主要研究結(jié)果和結(jié)論如下：一、不同濃度LPS刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，在刺激3h開始時即可使HUVEC分泌大量的IL-6和sICAM-1，同時發(fā)生不同程度的壞死和凋亡。其中以LPS100ng/ml作用24h最為明顯，LPS100ng/ml可以復(fù)制出典型的血管內(nèi)皮炎性損傷模型。 二、糖

3、皮質(zhì)激素(Dex)能明顯抑制LPS誘導(dǎo)的IL-6和sICAM-1的分泌，并抑制HUVEC的凋亡。糖皮質(zhì)激素(Dex)的抑制作用呈一定的劑量依賴現(xiàn)象，當(dāng)Dex濃度為10-6mol/L時，其抑制作用最為明顯，超過這個濃度其抑制作用并沒有明顯增加。表明：糖皮質(zhì)激素能保護(hù)LPS對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的致傷作用，并呈一定的劑量依賴，10-6mol/L是GC發(fā)揮最大作用的濃度上限。 三、HUVEC本身在基礎(chǔ)狀態(tài)下即有一定量的GR、MR表達(dá)，LP

4、S和Dex均能使人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的GR表達(dá)有所下調(diào)，而大劑量(10-6mol/L)的Dex則可使MR的表達(dá)有所上調(diào)。表明：HUVEC有組成性的GR和MR表達(dá)，糖皮質(zhì)激素的作用有可能是通過MR發(fā)揮的。糖皮質(zhì)激素作用的非GR依賴途徑值得重視。 四、HUVEC本身在基礎(chǔ)狀態(tài)下即有一定量的11β-HSD表達(dá)，糖皮質(zhì)激素(Dex)能同時上調(diào)11β-HSD1和11β-HSD2的表達(dá)，但上調(diào)11β-HSD1的幅度明顯大于11β-HSD2(P＜

5、0.05)。表明：HUVEC有組成性的11β-HSD表達(dá)，這為GC的受體前調(diào)節(jié)提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。GC(Dex)在HUVEC內(nèi)的作用可通過上調(diào)11β-HSD1在受體前得到正反饋式的加強(qiáng)。此可視為其保護(hù)血管內(nèi)皮炎性損傷的一個機(jī)制。 五、LPS可同時上調(diào)11β-HSD2和11β-HSD1的表達(dá)，但其上調(diào)11β-HSD2的幅度明顯大于11β-HSD1(P＜0.05)。表明：LPS可通過受體前調(diào)節(jié)方式削弱糖皮質(zhì)激素的抗炎作用，此可視為LPS