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1、目的:本課題旨在利用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究,觀察強(qiáng)肝軟堅(jiān)丸對(duì)肝纖維化大鼠一般情況、肝組織病理學(xué)變化以及肝組織中MMP-2、TIMP-2表達(dá)的影響,研究強(qiáng)肝軟堅(jiān)丸對(duì)肝纖維化的干預(yù)和治療作用,探討其作用機(jī)理,為中藥抗纖維化治療拓展思路。
方法:本實(shí)驗(yàn)選取SPF級(jí)雄性SD大鼠120只,體重180~200g,隨機(jī)數(shù)字表法將其分為正常對(duì)照組、模型組、秋水仙堿治療組、秋水仙堿干預(yù)組、強(qiáng)肝軟堅(jiān)丸治療組、強(qiáng)肝軟堅(jiān)丸干預(yù)組6組。除正常對(duì)照組外,各組均采用
2、未滅活豬血清腹腔注射造模,0.5ml/只/次,每周兩次,正常對(duì)照組同劑量生理鹽水腹腔注射。各干預(yù)組造模同時(shí)1次/日灌胃給藥:秋水仙堿溶液0.1g/Kg(秋水仙堿濃度為0.01g/ml)、強(qiáng)肝軟堅(jiān)丸溶液2g/Kg(藥物濃度為0.2g/ml),正常組、模型組和各治療組每天同劑量滅菌水灌胃。于造模第5周末各組均隨機(jī)抽取5%大鼠斷頭處死,肝組織病理提示造模成功,第6周初開(kāi)始分別給予各治療組藥物灌胃,方法和劑量同各干預(yù)組。于造模10周結(jié)束后禁食1
3、2h,各組均隨機(jī)取十只大鼠斷頭處死,采集肝組織標(biāo)本,通過(guò)常規(guī) HE染色和Masson染色觀察各組大鼠肝組織病理學(xué)變化并進(jìn)行Masson染色肝纖維化半定量分析;通過(guò)免疫組化染色,用圖像分析法檢測(cè)各組肝組織基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2和其抑制因子TIMP-2的表達(dá)。
結(jié)果:(1)強(qiáng)肝軟堅(jiān)丸可改善免疫損傷性肝纖維化大鼠一般情況和肝纖維化程度;
(2)強(qiáng)肝軟堅(jiān)丸可使免疫損傷性肝纖維化大鼠肝組織中MMP-2的表達(dá)升高、TIMP-2
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