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文檔簡介
1、目的:本課題通過觀察不同濃度的復方半枝蓮對肝纖維化大鼠模型肝臟組織學改變和血清指標的影響,探討和評價復方半枝蓮抗肝纖維化的作用機制,為復方半枝蓮在臨床上的進一步推廣應用提供理論依據(jù)。
方法:將60只SPF級SD雄性大鼠隨機分成6組,分別為正常組(第1組)、模型組(第2組)、復方半枝蓮低劑量組(第3組)、復方半枝蓮中劑量組(第4組)、復方半枝蓮高劑量組(第5組)、秋水仙堿組(第6組),每組10只。第1組采用普通飼料喂養(yǎng),飲自來水
2、,每天早上空腹用生理鹽水灌胃一次,共4w;第2、3、4、5、6組采用皮下注射40% CCl4配合高脂飼料和酒精干預方法建立大鼠肝纖維模型,自造模之日起各組每天早上分別空腹灌胃生理鹽水、復方半枝蓮低劑量溶液、復方半枝蓮中劑量溶液、復方半枝蓮高劑量溶液、秋水仙堿混懸液,共灌胃給藥4w。4w后取血、取肝臟。全血靜置離心后取血清,以全自動生化分析儀測定大鼠肝功能,放射性免疫方法(RIA)檢測PCⅢ、ColⅣ、HA、LN的含量;肝臟用生理鹽水沖洗
3、后拍照,并留取肝臟左葉做石蠟切片,采用HE、Masson染色,光鏡下觀察肝組織病理學變化,參照組織學活動指數(shù)(HAI)標準對纖維化進行分級測定;免疫組織化學(IHC)方法檢測肝組織MMP-2、TIMP-2的表達,以半定量方法評定。
結(jié)果:(1)血清學檢測結(jié)果:模型組大鼠血清ALT、AST、PCⅢ、ColⅣ、HA、LN水平均升高,各給藥組大鼠血清AST、ALT、PCⅢ、ColⅣ、HA、LN水平不同程度降低。(2)肝組織病理學改變
4、:模型組大鼠肝細胞明顯變性、壞死,增生的肝細胞被大量膠原纖維包繞形成假小葉,各給藥組大鼠肝細胞的變性、壞死均有不同程度改善,膠原纖維數(shù)量明顯少于模型組。(3)免疫組化結(jié)果:模型組MMP-2/TIMP-2明顯表達,正常組和各用藥組均低表達。
結(jié)論:復方半枝蓮能夠明顯改善肝纖維化大鼠模型的肝功能,降低其血清肝纖維化指標PCⅢ、ColⅣ、HA、LN水平,顯著改善肝組織病理學損害,其抗肝纖維化的作用機制可能與復方半枝蓮能降低MMP-2
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