肝復(fù)康對(duì)肝纖維化大鼠肝組織PI3K-PKB信號(hào)通路的影響.pdf

1、目的：肝纖維化（hepatic fibrosis，HF）是各種慢性肝病共同的病理過程，如能阻斷及逆轉(zhuǎn)肝纖維化，可減少嚴(yán)重后果的發(fā)生。目前已有研究證明肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的，因此積極的防治肝纖維化，阻斷肝纖維化的進(jìn)展有十分重要的意義。 多種細(xì)胞因子參與肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程，它們通過多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，對(duì)這一過程進(jìn)行精密調(diào)控。近年來(lái)，越來(lái)越多的研究顯示磷脂酰肌醇-3（PI3K）激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在肝纖維化的發(fā)生中有著重要的作用。本實(shí)驗(yàn)

2、通過對(duì)肝纖維化大鼠肝功能生化指標(biāo)及磷脂酰肌醇-3激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的評(píng)價(jià)，探討磷脂酰肌醇-3激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在肝纖維化形成中的作用，為中藥治療肝纖維化提供參考依據(jù)。 方法：將SD大鼠隨機(jī)分為7組：正常對(duì)照組（C）、模型組（M）、模型對(duì)照組（MC）、低劑量治療組（LT）、中劑量治療組（MT）、高劑量治療組（HT）和預(yù)防組（P）。除正常對(duì)照組外，其它大鼠皮下注射10%的四氯化碳12周制備肝纖維化的模型。其中預(yù)防組于造模同時(shí)以肝復(fù)康煎劑

3、灌胃12周。低劑量治療組、中劑量治療組、高劑量治療組則于造模第9周后開始以肝復(fù)康灌胃12周。治療結(jié)束后處死各組大鼠測(cè)定血清中白蛋白（albumin），總蛋白（total protein），谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT），谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）的含量；HE染色觀察肝組織病理學(xué)變化：免疫組織化學(xué)方法觀察肝組織PDGF-BB和PDGFR-β的表達(dá)；逆轉(zhuǎn)

4、錄聚合酶鏈（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）法觀察磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol-3 kinase，PI3K），蛋白激酶B（protein kinase B，PKB），Ⅰ型膠原（CollagenⅠ）mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：（1）血清學(xué)指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)第20周，中劑量治療組與模型組相比，血清ALT降低（P<0．01），AST降低（

5、P<0．01），白蛋白升高（P<0．01），球蛋白降低（P<0．01），白、球比升高（P<0．01）。（2）肝組織病理學(xué)變化：模型組大鼠可見肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，大量纖維組織增生，部分包繞分割肝細(xì)胞形成假小葉。與模型組相比，中劑量治療組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)明顯改善。（3）肝組織免疫組化染色：模型組大鼠肝組織PDGF-BB和PDGFR-β的表達(dá)均明顯增多，中劑量治療組大鼠肝組織PDGF-BB和PDGFR-β的表達(dá)較模型組明顯減少，有顯著性差異。（4）

6、肝組織PI3K、PKB和Collagen I mRNA的表達(dá)：模型組大鼠肝組織PI3K和PKBmRNA的表達(dá)較正常對(duì)照組明顯上調(diào)（P<0．01）。中劑量治療組大鼠肝組織PI3K和PKBmRNA的表達(dá)較模型組明顯下調(diào)，有顯著性差異（P<0．01、P<0．01）。模型組大鼠肝組織Collagen I mRNA的表達(dá)明顯上調(diào)，與正常對(duì)照組相比有顯著性差異（P<0．01）。中劑量治療組大鼠肝組織Collagen I mRNA的表達(dá)較模型組明顯下