CD4-CCR5工程類重組二價抗體的研究與制備.pdf

1、現(xiàn)有的治療HI V抗體中，抗體與H IV病毒的特異性結(jié)合作用有限、對 HIV病毒感染的防治效果不明顯，我們針對性的研制出一種可與H IV病毒特異性結(jié)合、有效預(yù)防和治療H IV感染的抗H IV基因工程二價類重組抗體，我們設(shè)計了一種類似于天然抗體分子構(gòu)象的抗體分子，采用基因工程重組技術(shù)，并分離純化后得到的重組抗體，經(jīng)分子生物學(xué)及各種檢測技術(shù)檢測，證實此重組抗體具有抗H IV病毒感染的功能，具有一定的經(jīng)濟價值。
　　H IV病毒的感染是

2、通過病毒與靶細(xì)胞膜的融合進(jìn)行的，在這個融合過程中糖蛋白 g p120和跨膜蛋白 gp41起了關(guān)鍵作用。首先是由g p120與靶細(xì)胞上的CD4分子結(jié)合，然后再與趨化因子受體CC R5結(jié)合，從而導(dǎo)致病毒包被膜與靶細(xì)胞的細(xì)胞膜發(fā)生融合，伴隨著病毒進(jìn)入細(xì)胞，使人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生損傷。所以H IV與CD4分子和CCR5分子有著緊密的聯(lián)系，我們通過這兩種分子入手建立一種雙重抗體，來阻止病毒與細(xì)胞膜的融合，進(jìn)而來預(yù)防和治療愛滋病患者。
　　從HI

3、V病毒的進(jìn)入過程來看，其特點是其對CD4分子具有高度的親和性，可選擇性地與CD4分子結(jié)合，但是單一結(jié)合位點與H IV病毒的特異性結(jié)合作用有限，對HIV病毒的防治效果不明顯，我們引入了趨化因子受體CCR5分子，構(gòu)建成二價類重組抗體，這種重組類二價抗體可以同時與H IV病毒上的C D4位點和CCR5位點特異性結(jié)合的，從而阻止病毒與細(xì)胞膜的融合，可以實現(xiàn)雙重阻止HIV病毒感染宿主細(xì)胞的作用；這種重組抗體的制備理論切實可行，方法工藝簡單，基因工

4、程重組技術(shù)也是目前生物制藥的常用方法，它具有成本低，產(chǎn)量高，藥效好等傳統(tǒng)特點；通過實驗證明我們得到的重組二價抗體可有效作用于HIV病毒，并有效預(yù)防和治療H IV病毒感染。
　　重組的抗HIV基因工程二價類抗體構(gòu)建方法為：將人抗體的恒定區(qū)與C D4和C CR5連接形成的類抗體。其中C D4和C CR5主要是替換了人抗體的可變區(qū)并與恒定區(qū)連接。構(gòu)建方法運用DNA重組和蛋白質(zhì)工程技術(shù)，在基因水平上對抗體分子進(jìn)行組裝，構(gòu)建過程針對性強且易