口腔鱗癌分子診斷及分子分型生物標志物的初步研究.pdf

1、目的:口腔鱗癌的個體化診斷和治療需要分子診斷及分子分型方法的支持。本研究的主要目的是建立口腔鱗癌分子診斷及分子分型技術和方法,并對潛在的生物標志物進行篩選、分析和驗證,以確定口腔鱗癌分子診斷、分化程度、侵襲、轉移和個體化化療等相關的分子靶點。
　　方法:1.在前期基因表達譜研究初步篩選的78個口腔鱗癌相關基因基礎上,采用Real-time PCR的方法在mRNA水平檢測了120例臨床腫瘤組織標本和120例正常組織標本中78個候選基

2、因和1個管家基因的表達,并采用統(tǒng)計學方法分析和確定口腔鱗癌差異基因及與其發(fā)生、侵襲及轉移等相關基因表達譜型。
　　2.應用免疫組化方法在口腔鱗癌組織芯片中檢測cyclin D1蛋白表達,采用統(tǒng)計學方法分析cyclin D1蛋白表達與各項臨床病理學參數(shù)和預后的關系。
　　3.應用免疫組化技術檢測100例接受誘導化療(誘導組)和124未接受誘導化療(非誘導組)的晚期口腔鱗癌患者活檢組織標本中cyclin D1蛋白表達情況,分析該

3、蛋白表達與各項臨床病理學參數(shù)、化療療效及各亞組中的生存情況的關系,從而驗證該蛋白作為指導臨床個體化化療生物標志物的可行性。
　　結果:1.“SPP1+KRT15+MAI”3個基因是口腔鱗癌差異基因的表達譜型(AUC:0.986,95％CI:0.961-0.997;敏感度96.4％,特異度94.7％)。
　　2.“CDK2+ITPR1+PLAU”3個基因是預測病理分級高低(Ⅰ,Ⅱ級與Ⅲ級)的最佳基因表達譜型(AuC:0.811

4、,95％CI:0.726 to0.879;敏感度為86.7％,特異度為63.5％);而“MMP7+MMP1+p21+IL1RN+CDKN2A”5個基因是預測浸潤性生長的最佳基因表達譜型(AUC:0.749,95％CI:0.661 to0.823;敏感度為60.3％,特異度為87.7％)。
　　3.“PDGFRA+PLAU+SOX9+SPP1+CDKN2A+CASP1+MAL”7個基因是預測頸淋巴結轉移的最佳基因組合(AUC:0.7

5、69,95％CI:0.675 to0.846;敏感度為71％,特異度為75％);而"GPD1L+NMU”2個基因是預測原發(fā)灶分級的最佳基因表達譜型(AUC:0.743,95％CI:0.651 to0.822;敏感度為67％,特異度為79％)。
　　4.組織芯片中cyclin D1蛋白表達與口腔鱗癌各項臨床病理學參數(shù)比較,差異均無統(tǒng)計學意義;Kaplan-Meier生存分析發(fā)現(xiàn),cyclin D1低表達組患者與高表達患者相比明顯能獲

6、得更好的總生存(6.71±2.95&5.38±3.45,83.1％&43.2％;P=0.009)。多因素生存分析表明,cyclin D1表達(HR:2.260,95％CI:1.074-4.758;P=0.032)是判斷口腔鱗癌患者預后的獨立預測因子。
　　5.單純根據(jù)經(jīng)驗化療時,誘導組和非誘導組晚期口腔鱗癌患者無病生存和總生存均無明顯差異(P=0.929和P=0.760)。但誘導組中cyclin D1低表達患者更有可能化療有效(p

7、0.001),而且與高表達患者相比能夠獲得更好的總生存和無病生存(73％vs8％,P＜0.001;63％vs6％,P＜0.001)。更重要的是,誘導組中cyclin D1低表達患者與非誘導組中cyclin D1低表達患者比較明顯獲得更好的總生存(P=0.016):而誘導組中cyclinD1高表達患者與非誘導組中cyclin D1高表達患者相比明顯獲得更差的總生存(P=0.032)。多因素生存分析表明,cyclin D1表達是晚期口腔鱗癌

8、接受誘導化療患者預后判斷的獨立預測因子(P＜0.001)。
　　結論:1.“SPP1+KRT15+MAL”三個基因可能與口腔鱗癌發(fā)生密切相關,有望應用于口腔鱗癌分子診斷等領域。
　　2.“CDK2+ITPR1+PLAU”和“MMP7+MMP1+p21+IL1RN+CDKN2A”兩組基因表達譜型與口腔鱗癌組織分化程度和侵襲性生長密切相關,有望作為口腔鱗癌分子病理診斷潛在的生物標志物。
　　3.“PDGFRA+PLAU+S