應(yīng)用SELDI-TOF-MS篩選口腔鱗癌血清生物標(biāo)志物及建立人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)診斷模型的研究.pdf

1、目的：口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）是一類嚴(yán)重危害人類健康的疾病，直接影響到患者的進(jìn)食、發(fā)音和美觀。據(jù)統(tǒng)計(jì)OSCC約占口腔黏膜原發(fā)性惡性腫瘤的97%，占頭頸部惡性腫瘤的40%左右，對(duì)其癌前病變和早期惡變的識(shí)別和治療是OSCC早期診斷和預(yù)防的重要措施。我們利用SELDI技術(shù)對(duì)口腔鱗癌患者和正常對(duì)照的血清蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)Biomarker Wizard3．1系統(tǒng)軟件對(duì)蛋白質(zhì)豐度和質(zhì)荷

2、比（M/S）進(jìn)行分析，期望篩選出可用于臨床口腔鱗癌早期診斷和病情監(jiān)測(cè)的特異性血清生物標(biāo)記，并進(jìn)一步對(duì)口腔鱗癌患者和正常對(duì)照之間有顯著差異的血清蛋白質(zhì)峰進(jìn)行優(yōu)選，建立數(shù)據(jù)庫(kù)，結(jié)合人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)（ANN）建立診斷模型，從而突破傳統(tǒng)的應(yīng)用組織活檢才能確診口腔鱗癌的技術(shù)“瓶頸”。 方法：收集入院前未接受放、化療的口腔鱗狀細(xì)胞癌患者血清35例，其中男性21人，女性14人，年齡33-68歲，中位年齡51歲?；颊呔鶡o(wú)其他惡性腫瘤或嚴(yán)重內(nèi)科疾病，

3、抽血前均未行放、化療。發(fā)生部位：頰部5例，舌緣、舌腹及舌根部9例，牙齦7例，口底11例，咽旁3例，耳廓2例，其中伴頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移4例，術(shù)后診斷為鱗狀細(xì)胞癌，按WHO口腔鱗狀細(xì)胞癌組織分型標(biāo)準(zhǔn)分高分化、中分化、低分化3級(jí)，其中高分化（鱗癌Ⅰ級(jí)）32例，中-低分化（鱗癌Ⅱ-Ⅲ級(jí)）3例；根據(jù)抗癌聯(lián)盟（UICC）TNM臨床分期為T(mén)1、T2期20例，T3、T4期15例，患者均無(wú)患癌家族史。以口腔粘膜潰瘍病人（病檢確診為非癌性病變）為正常對(duì)照，共2

4、2例，其中男性15人，女性7人，年齡范圍25-60歲，中位年齡50歲。運(yùn)用表面增強(qiáng)激光解吸離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜（SELDI-TOF-MS）技術(shù)檢測(cè)35例口腔鱗癌，22例正常對(duì)照，用AU芯片獲取血清蛋白表達(dá)指紋圖譜，并用Biomarker Wizard3．1軟件對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行初步的統(tǒng)計(jì)學(xué)分（計(jì)算均值X、P值和標(biāo)準(zhǔn)差S），P<0．05被認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從口腔鱗癌和正常對(duì)照血清蛋白質(zhì)指紋圖譜的具有顯著性差異的質(zhì)荷比中

5、，優(yōu)選出9個(gè)蛋白質(zhì)，應(yīng)用BP人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)建立口腔鱗癌神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)診斷模型。 結(jié)果：1．口腔鱗癌患者與正常人的血清間篩選出103個(gè)差異蛋白（p<0．05），其中9個(gè)蛋白有顯著性差異（p<0．001），有6個(gè)蛋白質(zhì)峰在口腔鱗癌血清中高表達(dá)，3個(gè)蛋白質(zhì)峰低表達(dá)，它們的M/Z分別為2775、3543、5906、5927、5948、5970、5990、6430、6626。2．人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型診斷口腔鱗癌的靈敏度為90%，特異度為89．2%，陽(yáng)